1、引物序列
N-U:5′-GCAAGCAGCAAAAGAAAAAGAAGG-3′；
N-L:5′-GCGTCGGCAAACTAAACTCCACAG-3′
2、预期扩增片断长度为 309bp，
3、反应条件：95℃预变性 5min 后，进行如下循环：94℃，30sec；
57℃，30sec；72℃，50sec，35 个循环。72℃延伸 30min。
二、猪圆环病毒
1、引物序列：
唐万寿等. 猪圆环病毒2型PCR检测方法的建立及其应用[J]. 动物医学进展.2008，29 (6):54-57
P1:5’-GAGTCTGGTGACCGTTGC-3’
P2:5’-TTCCTCCGTGGATTGTTC-3’ (493bp)
95℃ 5min, 94℃ 50s,52℃ 50,72℃50s,35循环，72℃ 10 min
2、扩增目的片段大小为
3、反应条件：
体系：
10×buffer 2.5
dNTP(2.5mM) 2
引物 P1(50pmol/μL) 0.5
引物 P2(50pmol/μL) 0.5
r-Taq (5U/μL) 0.2
ddH2O 16.3
DNA模板 3
Total 25
三、猪瘟
1引物序列：猪瘟
CSFV1:5’-GCTCCTGGTTGGTAACCTCGG-3’
CSFV2:5’-TGATGCTGTCACACAGGTGAA-3’
2片段大小：507bp
3反应条件：
采用 100 L反应体系, 在 20 L cDNA 产物管中加入 6 L 25 mmol/ L MgCl2 , 8 L 10 PCR
缓冲液, 100 pmol/ L引物XZ98 和引物 XZ99 各 1 L, 0 5 L 5 U/ L Taq DNA 聚合酶, 用无
菌水加至总体积为 100 L。置 PCR 仪上, 首先 94 变性 5 min; 然后 94 变性1 min, 60
退火1 min, 72 延伸 1 min, 循环 35次; 最后 72 延伸 10 min, 于 4 结束反应。
四、猪伪狂犬病
PRV1:5‘一GCGTGTACTGCGACTGCGTGTT一3‘，
PRV2:5‘一CGACCTGGCGTTTATTAACCGAGA一3
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