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山东***大学 专业 年级（ 科）
《生物制药工艺学》期末考试试卷（A卷）
姓 名： 学 号： 班 级: 考试时间： 补（重）考：（否） 题号 得分 一 二 三 四 五 六 七 八 总分 核分人 －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
说明：本试卷总计100分，全试卷共5页，完成答卷时间2小时。
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阅卷人 得分 （签全名）
一、填空题（本大题共10题，每题1分，共10分）
1．微生物的诱变育种常用的诱变剂有物理诱变剂、化学诱变剂和 。 2．工业生产中对大量培养基和发酵设备的灭菌，最有效最常用的方法是 。 3．微生物菌种的 是指利用微生物在一定条件下产生自发突变的原理，通过
分离、筛选排除衰退型菌株，选择维持原有生产水平的菌株的过程。
4．在超临界流体萃取过程中，为提高溶解度小的物质的溶解能力，常加入 。 5．采用液氮超低温保藏法保藏菌种时，应将盛装菌种的安瓿管保藏在 ℃液氮管中进行保存。
6．高分子聚合物沉淀法中应用最多的沉淀剂是 。 7．疏水相互作用色谱常用的分离载体为多聚糖和 。 8．较纯的固体一般有 和无定形沉淀两种状态。 9．抗生素包括天然抗生素、半合成抗生素和 。 10．需要通过工业发酵生产的维生素为 和 。
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得分 阅卷人 （签全名）
二、单项选择题（本大题共10 题，每题1分，共10分）
1．采用冷冻干燥法保存菌种时常用的保护剂是（ ）。
A．乙醇 B．甘油 C.脱脂牛奶 D．液体石蜡 E．蛋白胨 2．蛋白质盐析常用的中性盐是（ ）。
A．碳酸钙 B．磷酸钠 C.氯化钠 D．硫酸镁 E．硫酸铵 3．采用有机溶剂沉淀法时，最重要的因素是（ ）。
A．温度 B．湿度 C.压力 D．pH E．金属离子 4．次级代谢产物的产生菌一般是（ ）。
A．细菌 B．放线菌 C.霉菌 D．噬菌体 E．真菌
5．利用物质在互不相溶的两水相间分配系数的差异来进行萃取的方法，称为（ A．离子交换法 B．等电点沉淀法 C.亲和色谱法 D．双水相萃取法 E．吸附法6．聚电解质沉淀法中应用较多的沉淀剂为（ ）。
A．聚乙二醇 B．酸性多糖 C.EDTA D．EDTA-Na E．硫酸铅 7．下面属于β-内酰胺类抗生素的是（ ）。
A．青霉素 B．链霉素 C.红霉素 D．土霉素 E．金霉素 8．目前分辨率和选择性最好的凝胶过滤介质为（ ）。
A．聚丙烯酰胺凝胶 B．葡聚糖凝胶 C.琼脂糖凝胶 D．聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶 E．葡聚糖琼脂糖凝胶 9．结晶过程的推动力是（ ）。
A．温度 B．pH C.溶质溶度 D．过饱和度 E．时间 10．链霉素发酵生产的菌种为（ ）。
A．产黄青霉菌 B．灰色链霉菌 C.红色链霉菌 D．金色链霉菌 E．土壤细菌 得分 阅卷人 （签全名）
三、多项选择题（本大题共10题，每题1分，共10分）
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。 ）
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1．下列产物属于初级代谢产物的是（ ）。
A.蛋白质 B.核酸 C.抗生素 D.生物碱 E.酶的抑制剂 2．有利于微生物休眠的条件是（ ）。
A.低温 B.干燥 C.富含氧气 D.缺乏营养物质 E.pH中性环境 3．培养基的成分包括（ ）。
A.碳源 B.氮源 C.磷源 D.硫源 E.水分 4．下列方法中，属于沉淀法的是（ ）。
A.盐析法 B.有机溶剂沉淀法 C.等电点沉淀法 D.高分子聚合物沉淀法 E.聚电解质沉淀法 5．吸附分离法中常用吸附剂包括（ ）。
A.活性炭 B.漂白土 C.氧化铝 D.硅胶 E.纤维素 6．主要依据筛分原理进行物质分离的膜分离法包括（ ）。 A.微滤 B.超滤 C.反渗透 D.透析 E.电渗析 7．影响膜截留率的因素包括（ ）。
A.pH B.离子强度 C.溶质分子大小 D.溶质分子形状 E.溶质溶度 8．结晶过程包括（ ）。
A.溶质溶解 B.形成过饱和溶液 C.晶核形成 D.晶体生长 E.晶体沉淀
9．下列属于水溶性维生素的是（ ）。
A.维生素A B. 维生素B C. 维生素C D. 维生素D E. 维生素E 10．下列抗生素中作用机理为核糖体水平抑制蛋白质合成的是（ A. β-内酰胺类抗生素 B. 氨基苷类抗生素 C. 大环内酯类抗生素 D. 四环类抗生素 E. 蒽环类抗生素 得分 阅卷人
（签全名）
四、判断题（本大题共10题，每题1分，共10分）
1．菌种选育的首要目的是为了提高生产能力。（ ）
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。 ）
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2．大多数培养基均采用高压蒸汽灭均法，即在105℃条件下灭菌20-30分钟。（ ） 3．发酵过程的控制从某种意义上说，是一种反馈控制。（ ）
4．广义上的种子制备是指从菌种开始到发酵罐接种之前的所有过程。（ ） 5．在生物大分子药物的生产过程中，分离过程的质量能决定全过程的成败。（ ） 6．等电点沉淀法适合于所有两性物质的沉淀分类。（ ） 7．截留分子量数值大小与截留分子的形状无关。（ ）
8．凝胶色谱分离法所用凝胶无需再生即可进行下一次应用。（ ） 9．降温速度越快，越容易形成微小的晶核。（ ） 10．抗生素最小抑菌浓度越高，抑菌作用越强。（ ） 得分 阅卷人 （签全名）
五、名词解释（本大题共 5题，每题2 分，共10 分）
1．生物制药 2．杂交育种 3．葡萄糖效应 4．浓差极化 5．亲和色谱分离法 得分 阅卷人 （签全名）
六、简答题（本大题共4题，每题5分，共20分）
1．简述生物制药的一般工艺过程。 2．离子交换层析的原理是什么？ 3．凝胶色谱分离法的优点。
4．工业生产中制备过饱和溶液的方法。 得分 阅卷人 （签全名）
七、写出工艺过程（本大题共2题，每题5分，共计10分）
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1．维生素C的二步发酵法制备工艺路线。 2．胰岛素的制备工艺路线。 得分 阅卷人 （签全名）
八、论述题（本大题共2题，每题10分，共计20分）
1．论述液氮超低温保藏法保藏菌种的操作过程和该方法的特点。 2．论述盐析分离法的操作及影响盐析效果的因素。
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《生物制药工艺学》期末考试试卷（A卷）参考答案
一、填空题（本大题共10题，每题1分，共10分）
1．生物诱变剂 2．蒸汽灭菌（湿热灭菌） 3．自然选育 4．夹带剂（提携剂、共溶剂、修饰剂） 5．-150—-196℃ 6．聚乙二醇 7．硅胶 8．结晶 9．全合成抗生素 10．VB2、VB12
二、单项选择题（本大题共10 题，每题1分，共10分）
1．C 2．E 3．A 4．B 5．D 6．B 7．A 8．E 9．D 10．B
三、多项选择题（本大题共10题，每题1分，共10分）
1．AB 2．ABD 3．A BCDE 4．A BCDE 5．A BCDE 6．AB 7．A BCD 8．BCD 9．BC 10．BCD
四、判断题（本大题共10题，每题1分，共10分）
1．V 2．X 3．V 4．V 5．V 6．X 7．X 8．V 9．V 10．X
五、名词解释（本大题共 5题，每题2 分，共10 分）
1．生物制药：以生物材料为原料或用生物技术、方法制造的药物。
2．杂交育种：将两个基因型不同的菌株经过吻合或接合，使遗传物质重新组合，从中分离和筛选出具有
新性状的过程。
3．葡萄糖效应：培养基中的葡糖糖的浓度过高，会加快菌体的代谢，使培养基中的溶解的氧不能满足有
氧呼吸的需要，使葡萄糖的代谢进入不完全氧化途径，产生酸性代谢产物，使pH降低，遏止某些产物的生物合成酶，这种现象叫做葡萄糖效应。
4．浓差极化：当溶剂透过膜而溶质留在膜上时，它使得膜面上的溶质浓度增大高于主体中溶质浓度，这
种现象称为浓差极化。
5．亲和色谱：利用生物大分子于某些对应的专一分子特意识别和可逆结合的特性而建立起来的一种分离
生物大分子的色谱方法。
六、简答题（本大题共4题，每题5分，共20分）
1．简述生物制药的一般工艺过程。
菌种→斜面培养→种子制备→发酵→发酵液预处理→提取精制→成品检验→包装 2．离子交换层析的原理是什么？
离子交换层析是根据溶液中各种电点颗粒与离子交换剂之间结合力的差异而进行的分离的技术。由于待分离的溶质分子带有不同性质的电荷和不同电荷量，因而在作为固定相的离子交换剂和流动相的洗脱液之间发生可逆交换作用，并通过调节洗脱液的PH值，或改变同性离子浓度等方法，使溶质分子移动的速度发生变化，从而达到分离的目的。 3．凝胶色谱分离法的优点：（1）操作条件温和，简便易行；（2）分离Mr范围广；（3）分离效果一般不受缓冲液组成的影响；（4）操作一次后无需再生即可进行下一次的分离
4．工业生产中制备过饱和溶液的方法：蒸发法，冷却法，化学反应结晶法，盐析结晶法，等电点法，复合法，共沸蒸馏结晶法。
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七、写出工艺过程（本大题共2题，每题5分，共计10分）
1．维生素C的二步发酵法制备工艺路线
H2 O2醋酸杆菌 假单胞菌 内酯化，稀醇化
葡萄糖 → d-山梨醇 → L-山梨糖 → 2-酮-L-古洛糖酸 → L-抗坏血酸 2．胰岛素的制备工艺路线 注：（）中内容为条件
猪胰→（刨碎）→胰片→（乙醇，草酸，提取）→酸醇提取液→（氨水碱化）→碱化液→（硫酸酸化）→酸性液→（减压浓缩）→浓缩液→（脱脂）→溶液→（氯化钠盐析）→盐析物粗品→（除酸性蛋白）→滤液→（锌沉淀）→沉淀→（除碱性蛋白，结晶）→结晶→（洗涤）→成品
八、论述题（本大题共2题，每题10分，共计20分）
1．论述液氮超低温保藏法保藏菌种的操作过程和该方法的特点
（1）操作过程：将菌种加入10%的甘油或5%的二甲基亚砜作为防冻保护剂；每个安瓿管或液氮包藏
管分装1ml的菌悬液，立即封口，封口后严格检查不能有裂纹。合格的管以每分钟1℃的速度冷冻到-25℃后再放入液氮罐，在-150℃—-196℃的温度下保存。细胞复苏时应快速解冻。
（2）特点：①适合不能采用冷冻干燥法保藏的菌种
②保藏对象广泛，几乎所有的微生物及动植物细胞均可保藏 ③对各种培养形式的微生物均能进行保藏 ④保藏期限长，可达15年以上 ⑤有效、可靠
2.论述盐析分离法的操作及影响盐析效果的因素。
（1）操作过程：中性盐的选择，pH的选择，温度、时间的控制，盐饱和度的控制 （2）影响因素：①盐的性质
②pH值
③盐的饱和度 ④蛋白质的浓度 ⑤温度
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