地中海贫血基因携带者476例基因检测分析

ｌｌ７８　Ｇｕａｎｇｘｉ　ＭｅｄｉｃａＺ　ＪｏｕｒｎａＺ，Ａｕｇ．２０１５，Ｖｏ１．３７，Ｎｏ．８　峨　地中海贫血基因携带者４７６例基因检测分析▲　丁燕玲　罗世强　韦家伟许泽辉王秋华崖娇练蔡鹏飞　唐　宁（广西科技大学附属医院柳州市妇幼保健院检验科，柳州市钟青燕覃柳群　严提珍黄际卫　５４５００１，Ｅ－ｍａｉｌ：１３６５１９１２３５＠ｑｑ．ｃｏｍ）　对４７６例无贫血症状的地贫基　；Ｂ地贫最多见的基因　【摘要】　目的探讨无贫血症状的地中海贫血（地贫）基因携带者基因类型。方法因携带者基因检测结果进行回顾性分析。结果４７６例无贫血症状的地贫基因携带者中０【地贫３８０例（７９．８％），Ｂ地贫６２　例（１３．０％），　Ｂ复合型地贫３４例（７．１％）；ＯＩ．地贫最多见的基因类型为．．　ＥＡ／　、一ｄ　’／ａｃｔ、仪　类型为ｐ４１－４２／Ｎ、１３１７／Ｎ、ｐＥ／Ｎ；ａ１３复合地贫最多见的基因类型为ＳＥＡ／ａａ复合　１－４２／Ｎ，一姒／ｅｔａ复合￣１７／Ｎ、一　’／ａａ　复合ｐ４１－４２／Ｎ。结论无贫血症状的地贫基因携带者为我国最常见的地贫基因类型的杂合子状态，在地贫高发区应重视　无贫血症状的地贫基因携带者的基因检查，以减少地贫患儿的出生。　【关键词】　地中海贫血；基因检测；血红蛋白；无症状　【中图分类号】Ｒ　５５６．７１　【文献标识码】Ａ　【文章编号】０２５３．４３０４（２０１５）０８．１１７８—０３　ＤＯＩ：１０．１　１６７５／ｊ．ｉｓｓｎ．０２５３．４３０４．２０１５．０８．３９　地中海贫血（地贫）是我国南方尤其是广西最为高　发的遗传性溶血性疾病，中间型和重型地贫可用血红蛋　白电泳等血液学常规筛查方法检出　，而地贫基因携带　者在日常工作及生活中无明显异常表现，甚至部分携带　圳益生堂生物企业有限公司提供。　１．３　正常参考值Ｈｂ男性１３１～１７２　ＨＥ，女性　１１３—１５１　ｇ／Ｌ；ＲＢＣ男性４．０９×１０　／Ｌ一５．７４×ｉ０　／Ｌ，　女性３．６８×１０　／Ｌ～５．１３×１０“／Ｌ。　者在常规的体格检查中亦难以发现。近年，笔者用基因　诊断技术检查出４７６例血红蛋白正常、无任何临床症状　的地贫基因携带者，现报告如下。　１．４统计学分析采用ＳＰＳＳ　１３．０软件进行统计分析，　计量资料以（　±ｓ）表示，多组均数比较采用方差分析，　以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。　１资料与方法　１．１　临床资料２０１４年１月至２０１５年４月在我院婚　２结果　检、产检的地贫基因携带者４７６例，其中男性２８７例，女　性１８９例。年龄１８—５Ｏ岁；４７６例血红蛋白（Ｈｂ）均在　正常值范围。　１．２检测方法　２．１基因诊断结果及３类地贫基因携带者Ｈｂ、ＲＢＣ比较　基因诊断为　地贫基因携带３８０例（７９．８％），Ｂ地贫　６２例（１３．０％），仪Ｂ复合地贫３４例（７．１％）。３类地贫基　因携带者ｌｉｂ、ＲＢＣ比较，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。　见表１。　１．２．１血液常规检查：使用深圳迈瑞生物医疗电子股　份有限公司生产的全自动血液细胞分析仪测定血红蛋　白（ｎｂ）、红细胞（ＲＢＣ）。　表１　３类地贫基因携带者Ｈｂ、ＲＢＣ比较（　４－ｓ）　１．２．２基因诊断：使用美国ＡＢ１９７００扩增仪进行检测，　分析　地贫３种（一ｓＥ　／、．０【　／、．０【　・。／）缺失和血红蛋白　Ｃｏｎｓｔａｎｔ　Ｓｐｒｉｎｇ（ＨｂＣＳ）、血红蛋白Ｑｕｏｎｇ　Ｓｚｅ（ＨｂＱＳ）、血　红蛋白Ｗｅｓｔｍｅａｄ（ＨｂＷＳ）等点突变；分析已知的１７种　中国人Ｂ地贫常见点突变。仅地贫基诊断试剂盒由亚　ｄ地贫　３８０　１４６．５±１１　１２４±７．３　５．９３±０．５８　５．０６±０．６　６　４－０．５　５．６±０．３８　Ｂ地贫　６２　１３６．９　－４９．３　１２４±７．３　６．４ｏ【Ｂ复合地贫３４　１３８．２　４－９．４　１１９±４．６　６．１６±Ｏ．５３　５．１±Ｏ．４６　，值　Ｐ值　１９．６４８　＜Ｏ．００１　５．２０２　＜Ｏ．００６　１７．０７１　＜Ｏ．００１　６．０９３　＜０．００２　能生物（深圳）有限公司提供，Ｂ地贫基诊断试剂盒由深　▲基金项目：广西柳州市科学研究与技术开发计划（２０１４Ｇ０２０４０４）　作者简介：丁燕玲（１９７１一），女，本科，副主任技师，研究方向：细胞遗传和分子遗传及相关疾病的产前诊断。　通信作者：黄际卫（１９８５一），男，博士，实验师，研究方向：遗传病的分子基础与诊断，Ｅ－ｍａｉｌ：２６９１４５３３３＠ｑｑ．ｃｏｎ。ｒ　西医学　２０１５年８月第３７卷第８　１１７９　２．２仪地贫的基因型分布３８０例　地贫的基因型比　表４　Ｂ复合型地贫的基因型分布　例最高的３种依次为＿＿ＳＥＡ／ａａ、．　／　仅、仪岱　０【仅，分别　占４８．２％、１９．５％、１３．４％。见表２。　表２　地贫的基因型分布　２．３　Ｂ地贫的基因型分布６２例Ｂ地贫的基因型比例　最高的３种依次为　１－４２／Ｎ、￣１７／Ｎ、１３Ｅ／Ｎ，分别占　４６．８％、３３．９％、６．５％。见表３。　表３　Ｂ地贫的基因型分布　２．４　ｐ复合型地贫的基因型分布发现　突变与ｐ突　变组合共１３种，主要为两种基因常见突变的组合，其中　３４例　Ｂ复合型地贫的基因型比例最高的３种为＿＿ＳＥＡ／ａａ　复合Ｂ４１－４２／Ｎ（８／３４，）、一ｓＥ　／　０【复合１３１７／Ｎ、．　／ａａ复　合１３４１－４２／Ｎ，分别占２３．５％、２３．５％、１４．７％。见表４。　基因类型　｝　比　３讨论　本组地贫基因携带者４７６例中，以仪地贫基因携带者　比率最高，占７９．８％，可能与广西ＯＩ．地贫的高出生率有　关　。我国Ｏ／．地贫常见的基因类型有东南亚缺失型　（一　／）、左缺失型（．０【　／）、右缺失型（．仅　／）３种，非缺　失型的点突变有Ｉ－ＩｂＣＳ、胁Ｑｓ、ＨｂＷＳ　３种　。本文结果显　示，最高的几种基因依次为一ＳＥＡ／吡（１８３／３８０，４８．２％），　．仅。　／　０【（７３／３８０，１９．５％），０／．ｃｓ　ａ／ｏＬｏ￣（５１／３８０，１３．４％），　．０【　／ｏＬａ（３１／３８０，８．２％），仅ｗＳ∞／０【仪（１７／３８０，４．５％），　仪　ａ／ａａ（７／３８０，１．８％）。０／，基因位于１６号染色体上，每　条染色体有２个同源的Ｏｒ，基因，静止型　地贫只有一个　发生缺失或突变，这一类人群一般无临床症状，因部分静　止型地贫与健康人无异，甚至一般的血液学筛查也难以　发现，目前这一类人群只能通过基因检测发现　。标准　型０／．地贫包括０／，￣－地贫杂合子（－．／０【仅）、ｆｔ，　地贫纯合子、双　重杂合子（－ａ／一０／．或．ａ／ｃｘＴｃｘ），有２个ｄ基因发生缺失或　突变，由于还有其他两个　基因仍有合成ｄ珠蛋白功能，　故临床上也表现为无症状的携带者，往往仅表现为红细　胞参数的变化，出现小细胞低色素症　。如张永良等　报告３３７例静止型和标准型０／．地贫中，Ｈｂ、ＲＢＣ等大多血　液学检查指标差异与正常人无明显差异。　我国目前发现的Ｂ地贫基因有４０多种，笔者做了常见　的１７种突变位点的检查。本组１３基因携带者占１３．０％，出　现频率最高者依次为Ｂ４１．４２／Ｎ（２９／６２，４６．８％），［３１７／Ｎ　（２１／６２，３３．９％），１３Ｅ／Ｎ（４／６２，６．５％），１３２８／Ｎ（３／６２，　４．８％），１３７１－７２／Ｎ（３／６２，４．８％）。Ｂ基因位于１１号染　色体上，每条染色体有１个ｐ基因，Ｂ地贫主要由基因　１１８０　Ｇｕａｎｇｘｉ　ＭｅｄｉｃａＺ　ＪｏｕｒｎａＺ，Ａｕｇ．２０１５，Ｖｏ１．３７，Ｎｏ．８　的点突变引起，基因携带者主要为１３　或１３。杂合子。当　一参考文献　个基因发生缺陷时，另一个正常基因仍能合成相当数　［１］Ｘｉｏｎｇ　Ｆ，Ｓｕｎ　Ｍ，Ｚｈａｎｇ　Ｘ，ｅｔ　ａ１．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｓｕｒｖｅｙ　ｏｆ　ｈａｅｍｏｇｌｏｂｉｎｏｐａｔｈｉｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｚｈｕａｎｇ　Ａｕ—　量的珠蛋白链，故临床上除可能有红细胞形态改变外基　本没有贫血症状　Ｊ。　ｔｏｎｏｍｏｕｓ　Ｒｅ，ｏｎ　ｏｆ　ｓｏｕｔｈｅｒｎ　Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｇｅｎｅｔ，２０１０，　７８（２）：１３９—１４８．　既然有ａ和Ｂ两种不同的地贫，就可能有两种复合　的现象　。本组ｄＢ复合型地贫占７．１％，出现频率最　高基因型依次为＿ＳＥＡ／　仪复合　１＿４２／Ｎ（８／３４，　２３．５％），一　／ａｃｔ复合１３１７／Ｎ（８／３４，２３．５％），一ａ　／ａａ　复合　１－４２／Ｎ（５／３４，１４．７％），一０【　ａ／ａａ复合１３１７／Ｎ　（３／３４，８．８％），均为仅和Ｂ地贫中发生频率最高者的杂　［２］唐宁，杨金玲，黄丽华，等．１５　３７３例新生儿脐血ｏ【．地　中海贫血的筛查分析［Ｊ］．检验医学与临床，２００９，６　（１１）：８７６—８７７．　［３］唐娟，张崇林，蒋群芳，等．桂林地区地中海贫血产前　诊断胎儿基因型探讨［Ｊ］．中国优生与遗传杂志，２０１５，　２３（１）：１６一ｌ７．　合状态。由于ｄ与Ｂ基因均出现缺陷，两种珠蛋白链合　成降低可能达到相对平衡，故临床上也可能不表现出地　贫症状　。因此在进行人群筛查和产前诊断过程中应　兼顾０【与Ｂ基因均出现缺陷的复合型地贫　。　［４］　徐湘民．地中海贫血预防控制操作指南［Ｍ］．北京：人民　军医出版社，２０１１．　［５］　张永良，汪伟山，周玉球，等．仅．地中海贫血基因型和红　细胞参数关系的研究［Ｊ］．中华检验医学杂志，２０１２，３５　（５）：４１８—４２２．　广西每年约有１７万携带地贫基因的新生儿出生、　每年有超过３　０００例重症地贫患儿出生　。蔡稔等　调　查发现广西柳州市　地贫基因携带率为１１．１９％，Ｂ地　贫基因携带率为６．７８％。地贫严重危害人们的身体健　康，给社会和家庭带来沉重的负担。无症状的地贫基因　携带者虽然血液检查的Ｈｂ、ＲＢＣ等常规指标与正常人　无明显差异，在生长发育及健康寿命上也没有太大影　响，故而未得到应有的重视，但是，如果夫妻双方都是同　一［６］裴元元，魏凤香，刘秀菊，等．　Ｂ复合型地中海贫血及非　缺失型仅－地中海贫血患者基因检测的相关研究［Ｊ］．中　国优生与遗传杂志，２０１３，２１（１０）：２０—２１．　［７］阮丽明，周艳洁，朱茂灵，等．ＱＢ复合型珠蛋白生成障碍　性贫血的基因型及血液学分析［Ｊ］．国际检验医学杂志，　２０１３，３４（１１）：１　４６２—１　４６４．　［８］张慧敏，李少英，刘维强，等．　Ｂ复合型地中海贫血的分　子检测及血液学分析［Ｊ］．中国优生与遗传杂志，２０１１，　１９（７）：３１—３２．　基因携带者时，就有可能生出重型地贫的后代。在人　［９］蔡稔，李莉艳，梁听，等．柳州市城镇人群仅和Ｂ地　群中筛查地贫基因携带者是阻止和减少地贫患儿出生　的有效方法，故在有条件的医院应重视开展地贫基因携　带者的检查。　中海贫血的发生率调查和基因型鉴定［Ｊ］．中华流行病　学杂志，２００２，２３（４）：２８１—２８５．　（收稿日期：２０１５—０６—０８修回日期：２０１５—０８—１３）　●关于文稿中计量单位的使用　国务院于１９８４年２月２７日公布了《关于在我国统一实行法定计量单位的命令》和《中华人民共和国法定计量单位》。１９９３　年ｌ２月２７日国家技术监督局发布了《量和单位》国家强制标准及全国必须统一采用的计量单位。本刊严格执行国家的有关规　定。　我国的法定计量单位包括：（１）国际单位制的基本单位，如长度（Ｉｎ）、质量（ｋｇ）、时间（８）等；（２）国际单位制的辅助单位；　（３）国际单位制中具有专门名称的导出单位，如频率（Ｈｚ）、压力（Ｐａ）、能量（Ｊ）；（４）国家选定的非国际单位制单位，如时间（ｍｉｎ、　ｈ、ｄ）、转速（ｒ／ｒａｉｎ）；（５）由以上单位构成的组合形式单位，如速度（ｍ／ｓ）、浓度（ｍｏ￣Ｌ）；（６）由词头和以上单位所构成的倍数和　分数单位，如ｍ　ｋＰａ、ｍｌ等。在医学写作时必须严格执行国务院的命令和国家有关的标准。　各种单位除在无数值的叙述性文字中和科普读物中可使用中文名称或中文符号外，均应使用单位符号。单位符号都是正体　拉丁和希腊字母，无复数形式，符号后不附加圆点（正常语法名字尾标点符号除外）。来源于人名的单位，例如：Ｐａ、Ｇｙ、Ｗ等和　１０　以上的词头，例如：Ｍ、Ｇ、Ｔ等的首字母大写以外均为小写，容积“升”的符号可用大写（Ｌ）也可用小写（１），一般在单独使用不　加词头时用大写。数值与单位符号之间、单位符号与相邻的其他符号（例如：化学元素符号）之间应留半个阿伯数字空隙，词头与　其所组合的单位符号之间不需空隙。词头不能单独使用，也不能重叠使用（使用“ｍｌｘｍ”应为“ｎｌｎ”）。