散发性乳腺癌患者乳腺癌易感基因1 mRNA与蛋白的表达变化差异及意义论文

・８８４・生垡塞堕处型苤查垫！！生兰旦筮翌鲞筮兰塑垦！垫』坠￡！！堡：垒逝！垫！鱼：！尘：！！：塑！：兰・孚Ｌ腺夕ｂ乖－４－・散发性乳腺癌患者乳腺癌易感基因１ｍＲＮＡ与蛋白的表达变化差异及意义张楠孙刚马斌林作者单位：８３００１１乌鲁木齐，新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺头颈外科通信作者：马斌林，Ｅｍａｉｌ：ｍｂｌｄｏｃｔｏｒ＠１２６．ｃｏｒｎＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１１３０１－９０３０．２０１６．０４．００３【摘要】目的探讨散发性乳腺癌患者乳腺癌易感基因１（ＢＲＣＡｌ）ｍＲＮＡ与蛋白的表达变化及差异。方法应用荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ—ＰＣＲ）检测正常乳腺组织（ｎ＝４０）与散发性乳腺癌组织（ｎ＝８０）中ＢＲＣＡｌｍＲＮＡ的表达量变化；用免疫组织化学方法检测ＢＲＣＡＩ蛋白表达变化及定性观察ＢＲＣＡｌ蛋白亚细胞定位的变化，分析ＢＲＣＡｌ与散发性乳腺癌发生发展的相关性。结果（１）散发性乳腺癌组织中ＢＲＣＡＩｍＲＮＡ表达水平（０．７５９±０．４４０）低于正常乳腺组织（１．５３０±０．８１０），差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），原位癌伴微小浸润组（０．９５６±０．３４０）与浸润癌组ＢＲＣＡｌ（０．５６１±０．４４３）表达差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１），原位癌组表达水平高于浸润性乳腺癌组。（２）ＢＲＣＡｌ蛋白在正常乳腺组织高表达，在乳腺癌组织中表达降低，其阳性率分别为９５％和４６％，差异有统计学意义（，＝２７．０４０，Ｐ＜０．０１）；浸润性乳腺癌组织中ＢＲＣＡｌ蛋白表达水平低于导管原位癌伴微小浸润组织，差异有统计学意义（ｒ＝４．０３７，Ｐ＜０．０５）。本研究还观察到ＢＲＣＡｌ蛋白在正常乳腺组织中表达于细胞核，在乳腺癌组织中可以见到ＢＲＣＡｌ蛋白在细胞核与细胞质中均表达，且在细胞核上的表达率降低。结论ＢＲＣＡｌｍＲＮＡ与蛋白在散发性乳腺癌疾病进展过程中表达变化存在差异。【关键词】乳腺癌易感基因１；散发性乳腺癌；荧光定量聚合酶链反应基金项目：国家自然科学基金（８１３６０３９１）Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｃａｎｃｅｒｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｇｅｎｅ１ｍＲＮＡａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｉｎｓｐｏｒａｄｉｃｂｒｅａｓｔＣａｎｃｅｒＨｏｓｐｉｔａｌＺｈａｎｇＮａｎ，Ｓｕｎ能昭，ＭａＢｉｎｌｉｎＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｒｅａｓｔａｎｄＨｅａｄ—ＮｅｃｋＳｕｒｇｉｃａｌＯｎｃｏｌｏｇｙ．ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｏｆＸｉｎｊｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．Ｕｒｕｍｑｉ８３００ｎ．Ｃｈｉｎａｃｏｒｒｅｓｐｏ趔ｉ硝ａｕｔｈｏｒ：ＭａＢｉｎｌｉｎ，Ｅｍａｉｆ：ｍｂｌｄｏｃｔｏｒ＠１２６．ｃｏｍ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｉｎｍＲＮＡａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｂｒｅａｓｔｃａｎｃ—ｅｒｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｇｅｎｅ１（ＢＲＣＡｌ）ｄｕｒｉｎｇｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｓｐｏｒａｄｉｃｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ．Ｍｅｔｈ－ｏｄｓＢＲＣＡｌｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｓｐｏｒａｄｉｃｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｔｉｓｓｕｅｓ（ｎ＝８０）ａｎｄｎｏｌ＂ｍａｌｂｒｅａｓｔｔｉｓｓｕｅｓ（ｎ＝４０）ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｒｅａｌ—ｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（ＦＱ—ＰＣＲ）．ＴｈｅＢＲＣＡｌｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｔｉｏｎｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｔｈｅｃｏｒｒｅｌａ—ｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＢＲＣＡｌａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｓｐｏｒａｄｉｃｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｗａｓａｎａｌｙｚｅｄ．ＲｅｓｕｌＩｓ（１）ＢＲＣＡｌｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗａｓｌｏｗｅｒｉｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｔｉｓｓｕｅｓ（０．７５９±０．４４０）ｔｈａｎｉｎｎｏｒｍａｌｂｒｅａｓｔｔｉｓｓｕｅｓ（１．５３０±０．８１０）．ａｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｉｎｃａｒｃｉｎｏｍａｉｎｓｉｔｕ（ｗｉｔｈｍｉｎｉｍａｌｉｎｖａｓｉｏｎ）（０．９５６±０．３４０）ｔｈａｎｉｎｉｎｖａｓｉｖｅｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｓ（０．５６１±０．４４３，Ｐ＜０．０１）．（２）ＢＲＣＡｌｐｒｏｔｅｉｎｗａｓｈｉｇｈｌｙｅｘ—ｐｒｅｓｓｅｄｉｎｎｏｒｍａｌｂｒｅａｓｔｔｉｓｓｕｅｓ。ａｎｄ１０ｗｅｄｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｔｉｓｓｕｅｓ（ｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅ：９５％ｖｓ．４６％，ｙ２＝２７．０４０，Ｐ＜０．０１）．ＢＲＣＡｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗａｓａｌｓｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｉｎｉｎｖａｓｉｖｅｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｔｉｓ—ｓｕｅｓｔｈａｎｉｎｄｕｃｔａｌｃａｒｅｉｎｏｍａｉｎｓｉｔｕ（ｗｉｔｈｍｉｎｉｍａｌｉｎｖａｓｉｏｎ）（ｚ２＝４．０３７，Ｐ＜０．０５）．ＷｅａｌｓｏｏｂｓｅｒｖｅｄａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓｉｎｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｔｉｏｎｏｆＢＲＣＡｌｐｒｏｔｅｉｎＣＯｎｆｉｎｅｄｉｎｔｈｅｎｕｃｌｅｕｓｉｎｎｏｒｍａｌｂｒｅａｓｔｔｉｓｓｕｅｓ，ａｎｄｄｉｆｌｕｓｅｄｉｎｂｏｔｈｎｕｃｌｅｕｓ（ａｔｄｅｃｒｅａｓｅｄｌｅｖｅｌ）ａｎｄｔｈｅｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｔｉｓｓｕｅｓ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＢＲＣＡｌｍＲＮＡａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｌｔｅｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｓｐｏｒａｄｉｃｂｒｅａｓｔｅｒ．ｃａｎｃ－Ｓｐｏｒａｄｉｃｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ；Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓ。ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｇｅｎｅ１；ｃｅｎｔｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＦｕｎｄｐｒｏｇｒａｍ：ＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（８１３６０３９１）【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ乳腺癌的发生发展是一个多因素、多阶段过程。乳腺癌易感基因１（ＢＲＣＡｌ）是最早发现与乳腺癌发病万方数据生堡塞墅处叠苤查！Ｑ！！生兰旦筮！！鲞筮堡塑垦！也』垦坐兰！垡：叁Ｐ堕！垫！！，！！！：！！：丛！：垒・８８５・有关的易感基因，该基因的突变及异常表达与乳腺癌的发生、发展和转移有密切关系［１－３］。大量实验结果证明ＢＲＣＡｌ基因突变与家族性乳腺癌发病有关，而ＢＲＣＡｌ基因突变在散发性乳腺癌很少检测，但散发性乳腺癌患者中ＢＲＣＡｌｍＲＮＡ或蛋白的表达减少或缺失却不少见，由此推测ＢＲＣＡｌ作为抑癌基因也参与了散发性乳腺癌的发生发展，作为一种抑癌基因，ＢＲＣＡｌ功能丧失的程度可能与乳腺癌的恶性和分化程度密切相关ＨＪ。本研究旨在探讨散发性乳腺癌与ＢＲＣＡｌ的关系。资料与方法１．一般资料：收集２０１０年１月至２０１５年５月新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺头颈外科手术切除标本１２０例，包括４０例正常乳腺组织、４０例导管原位癌组织、４０例浸润性导管癌组织。手术标本离体后经液氮速冻后转移至一８０℃冰箱冻存。乳腺癌组纳入的患者Ｉ临床资料完整，无乳腺癌家族史，术前未接受化疗、放疗，且均无其他肿瘤疾病家族史。所有手术组织标本均经过本院病理科专业医师确诊。本研究经医院伦理委员会批准，标本留取前均告知患者并签署标本留取知情同意书。２．组织标本处理：乳腺癌组织在术中快速确诊后。由肿瘤研究所标本收集人员取材新鲜组织，放置在一８０℃冰箱冻存。正常乳腺组织来源于乳腺良性疾病患者的正常乳腺组织，采集新鲜组织，放置在一８０℃冰箱冻存。３．实验体系与仪器：反转录．聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）反应体系、荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ—ＰＣＲ）反应体系、ＡＢｌ７５００Ｆａｓｔ实时荧光定量ＰＣＲ仪。４．引物：由上海生工公司合成，由ＰｒｉｍｅｒＥｘｐｒｅｓｓ软件设计的ＢＲＣＡｌ及甘油醛－３一磷酸脱氢酶（ＧＡＰＤＨ）内参引物。引物序列：ＢＲＣＡｌ上游引物：５’一ｑＴＣＡＴｒＧ—ＧＡＡＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＴＧＧ－３’，下游引物：５’一ＡＣＣＡＧＡＴ—ＧＧＧＡＣＡＣＴＣＴＡＡＧＡＴ－３’；ＧＡＰＤＨ上游引物：５’．ＣＧ．ＧＡＧＴＣＡＡＣＧＧＡｒＩＴＩＴＧＧＴＣＧＴＡＴ．３’，下游弓Ｉ物：５’一ＡＧＣＣｒｌＴＣＴＣＣＡＴＧＧＴＧＧＴＧＡＡＧＡＣ－３’。５．ＦＱ—ＰＣＲ：（１）ＲＴ—ＰＣＲ反应：Ｔｒｉｚｏｌ法提取组织细胞总ＲＮＡ，用紫外分光光度及测定ＲＮＡ浓度和纯度，琼脂糖凝胶电泳鉴定ＲＮＡ的完整性。（２）反转录：取２ｌｘｇＲＴ．ＰＣＲ反应产物总ＲＮＡ按照宝生物公司（大连）ＴａＫａＲａ反转录试剂盒反转录合成ｃＤＮＡ。（３）ＦＱ—ＰＣＲ反应：采用ＳＹＢＲＧｒｅｅｎ法，按上海生工公司生产的ＱｕａｎｔＳＹＢＲＧｒｅｅｎＰＣＲ试剂盒，建立实时荧光定量反应体系，通过ＡＢｌ７５００Ｆａｓｔ实时荧光定量ＰＣＲ万方数据仪，采集反应数据。所有反应均设３个复孔，取平均值确定循环阈值（Ｃｔ）。ＢＲＣＡｌ的相对表达量采用２一ＡＡｃ。法计算。６．免疫组织化学染色：石蜡包埋组织，以厚５斗ｍ连续切片，免疫组织化学操作步骤按说明书进行。用已知阳性切片作为阳性对照，ＢＲＣＡｌ染色以细胞核和（或）细胞质内出现棕黄色颗粒为阳性，阴性细胞无着色。免疫组织化学结果分析：ＢＲＣＡｌ蛋白细胞核着色为阳性，细胞质或细胞质与细胞核均染色视为阴性，计算阳性细胞百分比。以阳性细胞百分比≥１０％为阳性，＜１０％为阴性。７．统计学方法：数据均以均数±标准差（ｘ±ｓ）表示，应用ＳＰＳＳ１７．０软件统计分析，并进行正态性分析。正态分布的数据用ｔ检验，计数资料采用疋２检验，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。结果１．散发性乳腺癌患者中不同病理阶段临床特点分析（表１）：腋窝淋巴结状态随着病程进展，阳性率增加，差异有统计学意义（１７．５％比５７．５％，Ｐ＜０．０１）。细胞核增殖抗原（Ｋｉ－６７）以２０％为分界点∞Ｊ，随着浸润的发展，表达率增高，差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。雌激素受体（ＥＲ）与孕激素受体（ＰＲ）表达水平在不同病理阶段差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。表１散发性乳腺癌中不同病理阶段临床特点分析（例）注：ＥＲ：雌激素受体；ＰＲ：孕激素受体；Ｋｉ－６７：细胞核增殖抗原２．正常乳腺组与散发性乳腺癌组中ＢＲＣＡｌｍＲＮＡ表达分析（表２，３）：散发性乳腺癌组中ＢＲＣＡｌｍＲＮＡ表达（０．７５９±０．４４０）低于正常乳腺组（１．５３０±０．８１０），差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），原位癌伴微小浸润组（０．９５６±０．３４０）与浸润癌组ＢＲＣＡｌ表达（０．５６１±・８８６・生堡塞鲨登抖釜蠢垫！！生垒旦箜墅鲞筮堡塑坠也』垦望量！堡：垒Ｐ堕垫！鱼：！！！：！！，№．堡０．４４３）差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１），原位癌组表达水平高于浸润性乳腺癌组。表２ＢＲＣＡｌｍＲＮＡ在正常乳腺组织与散发性乳腺癌中的表达（面±ｓ）注：ＢＲＣＡＩ：乳腺癌易感基因ｌ；Ｒ＇１１一ＰＣＲ：反转录．聚合酶链反应｝’Ｑ・ＰＣＲ：荧光定量聚合酶链反应；ＧＡＰＤＨ：甘油醛－３．磷酸脱氢酶表３ＢＲＣＡｌｎｌＲＮＡ在散发性乳腺癌中的表达（ｉ±ｓ）注：ＢＲＣＡｌ：乳腺癌易感基因１；Ｒ‘ｒ－ＰＣＲ：反转录一聚合酶链反应：｜’Ｑ—ＰＣＲ：荧光定量聚合酶链反应；ＧＡＰＤＨ：甘油醛．３，磷酸脱氢酶３．散发性乳腺癌组中ＢＲＣＡｌｍＲＮＡ表达与临床病理特征的关系（表４）：ＢＲＣＡｌｍＲＮＡ表达量在淋巴结阴性和Ｋｉ－６７≤２０％组高于淋巴结阳性和Ｋｉ一６７＞２０％组。ＢＲＣＡｌｍＲＮＡ表达与激素受体状态无明显４：日关。表４ＢＲＣＡｌ与散发性乳腺癌临床病理特征的关系注：ＢＲＣＡｌ：乳腺癌易感基冈１；ＥＲ：雌激素受体；ＰＲ：孕激素受体Ｈｅｒ－２：人类表皮牛长闶子受体－２；Ｋｉ４６７：细胞核增殖抗原４．正常乳腺组织与乳腺癌组织巾ＢＲＣＡＩ蛋白表达变化（表５，６）：ＢＲＣＡＩ蛋白在正常乳腺组织高表万方数据达，在乳腺癌组织表达降低，其阳性率分别为（９５％和４６％），差异有统计学意义（ｚ２＝２７．０４０，Ｐ＜０．０１）；浸润性乳腺癌组织中ＢＲＣＡｌ蛋白表达低于导管原位癌伴微小浸润组织，差异有统计学意义（ｘ２＝４．０３７，Ｐ＜０，０５）。本实验还观察到，ＢＲＣＡｌ蛋白在正常乳腺组织中表达于细胞核，在乳腺癌组织中细胞核与细胞质中均表达，且在细胞核上的表达率降低。表５ＢＲＣＡＩ蛋白在正常乳腺与散发性乳腺癌中的表达注：ＢＲＣＡｌ：乳腺癌易感基因１表６ＢＲＣＡｌ蛋白在散发性乳腺癌中的表达注：ＢＲＣＡｌ：乳腺癌易感基因ｌ讨论ＢＲＣＡｌ作为与乳腺癌特异相关的抑癌基因，其编码的蛋白在维护基因的稳定性与细胞通路中发挥重要的作用。ＢＲＣＡｌ的表达缺失与功能缺陷，可能导致基因不稳定性，增加肿瘤发生的风险∞』。致病的ＢＲＣＡｌ基因突变涉及家族性乳腺癌的发病，而ＢＲＣＡｌ功能在转录水平或翻译后的表观丢失或表达位置的变化可能造成散发性乳腺癌的发生＂Ｊ。本研究结果显示，ＢＲＣＡｌｍＲＮＡ及蛋白在乳腺正常组织与散发性乳腺癌组织中表达有差异，浸润性乳腺癌组织中表达低于原位癌组织，在这一动态变化过程中，ＢＲＣＡｌ蛋白的表达定位也发生动态的变化，由细胞核向细胞质中转移，这一研究结果表明ＢＲＣＡｌ基因与散发性乳腺癌发病相关，并观察到随着病程的进展发生动态的变化，进而推测因ＢＲＣＡｌ基因的动态变化推动了疾病的进展。有研究结果报道显示，ＢＲＣＡｌｍＲＮＡ的表达在癌组织中低于癌旁组织旧驯，提示ＢＲＣＡｌ随着疾病进展的过程，在转录的水平表达已经出现了下调，并有研究结果显示，抑癌基因ＢＲＣＡｌ启动子区的异常甲基化在肿瘤的发生和发展进程中发挥重要的作用¨…，本研究结果表明，ＢＲＣＡＩｍＲＮＡ在散发性乳腺癌组织不同病理阶段表达存在差异，浸润痛组织中的表达低于原位癌组织，证实ＢＲＣＡｌ基因参与ｒ散发性乳腺癌的发生发展，且在疾病发展过程中处于一个动态的变化。生坐塞叁处登苤盍垫竖生墨旦箜箜鲞筮兰搁些璺！曼翌墨坚强。纽鲤垫！鱼：！塑：望，塑空：璺・８８７・ＢＲＣＡＩ对乳腺癌的抑癌作用可能是通过其编码心１ＪＣｏｘＤＧ．ＳｉｍａｎｔＪ．ＳｉｎｎｅａＤ。ｅｔａ１．ＣｏｍｍｏｎｖａｒｉａｎｔｓｏｆｔｈｅＢＲＣＡｌｗｉｌｄｔｙｐｅａｌｌｅｌｅｍＤｄｉ如ｔｈｅｒｉｓｋｏｆｂｒｅａｓｔｃ＆ｎｏ∞－ｉｎＢＲＣＡｌｍｕｔａｔｉｏｎ的蛋白对正常细胞的分化与增殖的调控实现，这种调ｃ＿ｒ妇［Ｊ］．ＨｕｍＭｏｌＧｏｎｅｒ，∞ｌｌ，２０（２３）：４７３２－４７４７．控作用与ＢＲＣＡＩ蛋白准确定位在细胞核中的表达呈∞Ｉ：１０．１０９３／Ｉｍ衫ｄｄｒ３８８．口１ＪＣｌｍｅｄｕｄｃｋＭ．ＬｅｂｅａｎＡ。ＭａｒｘＡＨ。ｅｔａ１．Ｏｖｍｅｘｐｒｅ∞ｉｏｎｏｆｃｅｌｌｄｉｖｉ．平行关系。有研究结果提示，青年乳腺癌患者的ｓｉｏｎｃｙｃｌｅ７ｈｏｍａｌｏｇｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｇｅｎｅｍｐ陆ｃｕｌｌｏｎｆｒｅｑｕｅｎｃｙｉｎＢＲＣＡ蛋白表达明显低于良性乳腺病变和中老年乳腺Ｄ叭：１０．１０１６／ｊ．ｈｕｍｐｍｈ。２咖．嘴．∞８．ｂｒｍｓｔ蝴［Ｊ］．ＨｕｍＰａｔｈｏｌ，２０１０，４１（３）：３５８－３６５．癌患者，这种表达的降低或表达缺失可能青年乳腺癌Ｈ１Ｊ王深明，马浙夫．乳腺癌临床和实验研究的新进展［Ｊ］．中华实验发病年龄早及其恶性程度有一定关系ｕ¨。本研究结外科杂志，加１２，２９（５）：７８６－７８９．ＷａｎｇＳＭ．ＭａｚＦ．１１地ｎｅｗｐｍｇｒｅｓｓｏｆｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｃｌｉｎｉｃａｌａｎｄｅｘ－果显示，ＢＲＣＡＩ蛋白在正常乳腺组织高表达，在乳腺ｐｅｄｍｅｎｔａｌｒｅｓｅａｒｅｈ［Ｊ］．ＣｈｉｎＪＥ冲Ｓｕｒｇ，２０１２，２９（５）：７８６－７８９．ＤＯＩ：１０．３７即７Ｃｉｌｉａ．ｉ．ｉⅢ．１００ｌ－９０３０．２０１２．０５．００２．癌组织表达降低，与以往实验结论相符。本研究结果口１ＪＴａａｈｌｍａＲ．ＮｉｓｈｉｍｕｒａＲ．ＯｆｌａｋｏＴ．ｅｔａ１．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆａｎｏｐｔｉｍａｌｃｕｔ．显示，浸润性乳腺癌组织中ＢＲＣＡＩ蛋白表达水平低于ｏｆｆｐｏｉｎｔｆｏｒｒｅ［１邺ｔｉｖｅｔｈｅＫｉ－６７ｉｎｄｅｘ∞ａｐｒｏｇｎｅｓｔｉｅｆａｃｔｏｒｉｎｐｒｉｍｍ．ｙｂｒｅａｍＣａｌｌＯＷ＂：ａｓｔｕｄｙ［Ｊ】．Ｐ嗌Ｏｎｅ，２０１５。１０（７）：ｅｏｌｌ９５６５．导管原位癌伴微小浸润组织，提示ＢＲＣＡＩ蛋白的表达ＤｏＩ：１０．１３７１／ｊｏｎｍａｌ．ｐｏｎｅ．０１１９５６５．变化可能推动了疾病的进展。在这一变化过程中，№１ＪＭｉｌｎｅ豫Ｃ＾２皿抵∞ｒＩｉ曩ＢＩＲＬ．ＡｍｏｎｉｏｕＡＣ．Ｇ∞幽ｍｏｄ酗ｏｆｃａｎｃｅｒｒｉｓｋｆｏｒ瑚础ａｎｄＪＩ．ＡｎｎＯ∞０１．２０ｌｌ，２２Ｓｕｐｐｌｌ：ｉ１１－ｉ１７．ＢＲＣＡＩ蛋白的表达定位也发生了变化，正常乳腺组织ＤＯＩ：１０．１０９３／ａｎｎｏｎｅ／ｍｄｑ６６０．中表达于细胞核，在乳腺癌组织中可以见到ＢＲＣＡｌ蛋＂１ＪＲａｋｈａＳＥ，ｇａｎｄｉｌＭＡ。ｅｔｉｎ［１ｅａｓｔⅧｗＥＡ。日．Ｓｈｅｉｋｈａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｄ瑚ｔＣＡｌｐｍｔｍａｎｄｉｔｓｐＩ＿咿ｍ血ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ［Ｊ］．ＨｕｍＰａｄｍｌ，２００８，白在细胞核与细胞质中均表达，且在细胞核上的表达３９（６）：８５７国６５．ＤＯＩ：１０．１０１６／ｊ．ｈＩｍ呻ｌｈ．２００７．１０．０１１．率降低。然而本研究对于蛋白亚细胞定位只是定性观竺－１ＪＰｉ唱Ｌｉｕ，ＣｈａｏＷｕ，ＳｈｅｎｇｔｉＹａｎｇ．Ｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｎｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎ—察，还应进一步的采用免疫荧光实验定量观察蛋白表ｓｈｉｐｍｂｄ＿ｅ∞ＢＲＣＡｌａｎｄｈｅｒｅｄｉｔａｒｙｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ』ｋｆ．ＪＣｌｉｎＯｎｃｏｌ。２０１３，１２（１２）：６０２国０６．达定位的变化。Ｄｍ：ｌＯ．１００７／ｓ１０３３０．１２４７．２．Ｒｉｃｅ本研究通过两种实验方法，在ｍＲＮＡ与蛋白两个眇１ＪＪＣ．Ｑ诎Ｈ，ＭａｘｅｉｎｅｒＰ．ｅｔａ１．ＭｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＢＲＣＡｌｐｍ－ｍｏｔｅｔｉｓｖｉｉｔＩｌｄｅｃｒｅａｓｅｄ水平均证实ＢＲＣＡＩ参与了散发性乳腺癌发生发展的ｂｒｅａｓｔⅧｍｍｏｅｉｎｔｅｄＢＲＣＡＩｍＲＮＡｌｅｃｅｌｓｉｎｃｌｉｎｉｃａｌｓｐｅｃｉｍｅｎｓ［Ｊ］．Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ，２０００，２１（９）：１７６１－１７６７．过程，并观察到疾病进展是一个动态的变化过程，我们ＤＯＩ：１０．１０９３／ｏｎｒｅｉｎ／２１．９．１７６１．可以认为无论在转录水平还是翻译的过程中，凡是参［１０］ＦｕｌａｎＤ。ＳａｈｎｓｎｅＮ．ＢｅｍａｓｃｏｎｉＢ．ｅｔａ１．ＡＰＣａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓｍｂｅ－ｑｕｅｎｔｌｙｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｌｓｏｆａｃｉｎａｒｃｅｌｌ∞ｆｆＵｉｌｌｏｍａｏｆｔｈｅｐ－与并干扰ＢＲＣＡＩ表达的因素均会导致散发性乳腺癌ａＩｍｌ哪，ｍａｉｎｌｙｔｌＩ删咖ｇｅｎｅｌｏｓｓａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｒｈｙｐｅｒｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｖｉｒｅｈｏｗｓ的发生，当ＢＲＣＡＩｍＲＮＡ或蛋白变化的量累计到一定Ａｒｃｈ，２０１４．４６４（５）：５５３－５６４．ＤＯＩ：１０．１１３０７／ｓ００４２８－０１４．１５６２．１．程度，则会导致疾病的进展。［儿］朱丽萍，王斌。李涌涛，等．乳腺癌易感基因１、Ｋｉ．６７在青年乳腺癌患者组织中的表达及其临床意义［Ｊ］．中华实验外科杂志，参考文献２０１２。２９（５）：８３０－８３２．ＺｈｕＬＰ，ＷａｎｇＢ，ＬｉＹＴ，ｅｌａ１．ＴｈｅｄｉｎｉｅａｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆｂｒｅａｓｔｅＡｌｎｃ．［１］杨晓晨，胡震．ＢＲＣＡＩ和ＢＲＣＡ２基因外显率研究概况［Ｊ］．中华口ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｇｅｎｅＩａｎｄＫｉ－６７ｉｎｙｏｕｎｇｂｒｅａｓｔｔ∞ｎｃｅｒｔｉｍｅｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ临床医师杂志（电子版），２０１３，７（３）：１１７０一１１７３．ＪＥ邛ｓｉｎｓ，２０１２，２９（５）：８３０－８３２．ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｉ．ｉａａｎ．１００１－９０３０．２０１２．０５．０１８．ＹａｎｇＸＣ，ＨｕＺ．ＢＲＣＡＩａｎｄＢＲＣＡ２ｇｅｎｅｓｐｅｎｅｔｚａｎｃｅ［Ｊ］．ＣｈｉｎＪＣｌｉｎｉｃｉａｎｓ（ＥｌｅｃｔｍｌｄｃＥｌｉｄｏｎ），２０１３，７（３）：１１７０－１１７３．（收稿日期：２０１５・ｉ１－１０）ＤＯＩ：１０．３８７７／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４－０７８５．２０１３．０３．０６４．・读者－作者・编者・本刊关于论文写作中志谢的要求在文后志谢是表示感谢并记录在案的意思。对给予实质性帮助而又不能列为作者的单位或个人应在文后给予志谢。但必须征得被志谢人的书面同意。志谢应避免以下倾向：（１）确实得到某些单位或个人的帮助，甚至用了他人的方法、思路、资料，但为了抢先发表，而不公开志谢和说明。（２）出于某种考虑，将应被志谢人放在作者的位置上，混淆了作者和被志谢者的权利和义务。（３）以名人、知名专家包装自己的论文，抬高论文的身份，将未曾参加工作的，也未阅读过该论文的知名专家写在志谢中。被志谢者包括：（１）对研究提供资助的单位和个人、合作单位。（２）协助完成研究工作和提供便利条件的组织和个人。（３）协助诊所和提出重要建议的人。（４）给予转载和引用权的资料、图片、文献、研究思想和设想的所有者。（５）做出贡献又不能成为作者的人，如提供技术帮助和给予财力、物力支持的人，此时应阐明其支援的性质。（６）其他需志谢者。本刊编辑部万方数据