2将1.5-5.0ml培养后的菌在室温下10000%离心1min（选取试管底部的菌液 其余的弃掉。
3.加入250ul的Solution I /RNase A并涡旋或者用移液枪上下吸液使细胞充分 悬浮,避免细胞块。
4加入250ul的Solution U并轻轻地旋转摇匀直至清晰的溶菌产物。静置
2min,
不能超过5min,否则会出现染色体DNA剪切和质粒低纯度。Solution U不用，应迅 速旋紧瓶盖，避免与空气中CO ?接触。
5加350ul的Solution川迅速摇匀直到出现白色絮状物。（Solution川完全混匀 迅速至关重要。
6. 室温下＞ 13000离心10min。
7. 将上清液小心地吸出加到下方装有 2ml管的HiBind管中（务必小心吸取,切忌 将掺杂吸出，室温10000g离心1min使溶解产物完全通过 HiBind柱子。
8. 弃去2ml管中液体,加500ulBuffer HB清洗HiBind柱子，室温10000g离心 1min,使其完全通过HiBind柱子。（该步骤是用来去除残留的蛋白保证高质量的 DNA
9. 弃去2ml管中液体，加入700ul的含乙醇的DNA Wash Buffer洗脱HiBind柱 子，室温10000g离心1min。（DNA Wash Buffer必须加入无水乙醇，并在常温下使用
10. （可选择步骤弃2ml管中液体，加入700ul的含乙醇的DNA Wash Buffer再次 洗脱HiBind柱子，室温10000g离心1min。
11. 室温下＞ 13000空管离心2min使柱中物质干燥。（不可跳跃此步骤
12. 将HiBind柱子套入1.5ml离心管上加入30—50ul的Elution Buffer或者无菌 的去离子水于HiBind柱子中。室温静止1— 2min,.室温下＞ 13000g离心1min。（复 洗可能产生DNA残基,使浓度降低。
13. 收集离出液体,测定DNA浓度。
（附录为备选步骤，以上步骤为常规使用步骤 附录：
1. 准备真空 manifold管，将HiBind同manifold管连接。 2. 取以上步骤6中上清液至HiBind管中。 3. 打开真空源使样品通过柱子，关闭真空。
4加入500ulBuffer HB清洗HiBind柱子，打开真空源使液体通过 HiBind管。 5.HiBind管中加入700ul的含乙醇的DNA Wash Buffer,打开真空源使 DNA Wash Buffer通过HiBind柱子。加入700ul的含乙醇的DNA Wash Buffer重复该步 骤。
（DNA Wash Buffer必须加入无水乙醇，并在常温下使用
6将HiBind管组装到2ml样品收集管中，室温下＞ 13000离心2min使柱中物质 干燥。
7. 将 HiBind柱子套入1.5ml上离心管上，加入30—50ul的Elution Buffer或者无 菌的
去离子水于HiBind柱子中。室温静止1 — 2min,.室温下＞ 13000g离心1min。 8. 收集离出液体，测定DNA浓度
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