21世纪是生命科学世纪，生物经济时代，分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性，是人类认识论上的重大飞跃。生命活动的一致性，决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学，是生物学范围内所有学科在分子水平上的统一。 分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域，也是新世纪的带头学科。
分子生物学的研究将带动生物科学全面迅速地发展，生物科学的众多分支学科，将在更高层次上实现理论的大综合。
5、比较原核、真核基因组的特点（上海第二军医大硕士研究生入学考试试题）
一、原核生物基因组结构特点 1、基因组很小，大多只有一条染色体 2、原核生物基因主要是单拷贝基因 3、结构简炼
4、存在转录单元(trnascriptional operon)、多顺反子(polycistron) 5、有重叠基因
二、真核生物基因组结构特点 1、真核基因组结构庞大 2、含有大量重复序列 3、非编码序列多 4、转录产物为单顺反子 5、基因不连续性
6、存在大量的顺式作用元件。 7、存在大量的DNA多态性 8、端粒结构
2、简述RNA转录的基本概念基本过程？
转录(transcription)：DNA分子中的遗传信息转移到RNA分子中的过程称为转录。转录产物有mRNA ， tRNA和rRNA。 转录的基本过程：
1）无论是原核还是真核细胞，转录的基本过程都包括：模板识别、转录起始、通过启动子及转录的延伸和终止。 2）全酶上的
因子辨认DNA模板上的起始位点，使全酶结合在起始位点上形成全酶
-DNA复合物，从而开始“起始反应”； 3）转录开始后，
因子立即从复合物上脱落，由核心酶催化RNA的合成；
4）当转录到一定长度时，终止因子识别模板上的终止信号，终止转录，释放转录产物。 简述
因子的作用
因子来完成。
启动子的识别要靠
10.真核生物的原始转录产物必须经过哪些加工才能成为成熟mRNA，以用作蛋白质合成的模板？
答：内含子的剪接、编辑、在编码及化学修饰。
简述原核和真核生物mRNA的区别？ 原核生物mRNA的特征: A、半衰期短
B、多以多顺反子的形式存在
C、单顺反子mRNA：只编码一个蛋白质的mRNA。 D、多顺反子mRNA：编码多个蛋白质的mRNA
E、 5’ 端无“帽子”结构， 3’ 端没有或只有较短的poly（A ）结构 F、SD序列：mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。 真核生物mRNA的特征: a、5’ 端存在“帽子”结构
b、多数mRNA 3’ 端具有poly（A ）尾巴（组蛋白除外） C、以单顺反子的形式存在
什么是Pribnow box？它的保守序列是什么？
pribnow box是原核生物中位于转录起始位点上游-10区的TATA区，保守序列是TATAAT，其功能是RNA聚合酶中的σ因子与其特异结合使转录得以起始。
12.什么是RNA编辑？其生物学意义是什么？
答：是某些RNA，特别是mRNA前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA所编码的遗传信息的改变，因为经过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。
意义：校正作用、调控翻译、扩充遗传信息。 第四章
一、简述密码的简并性和同义密码子（武汉大学2003年试题)
由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为简并（degeneracy），对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子（synonymous codon）。
二、选择题：
1． 多数氨基酸都有两个以上密码子，下列哪组氨基酸只有一个密码子？D A．苏氨酸、甘氨酸 B．脯氨酸、精氨酸 C．丝氨酸、亮氨酸 D．色氨酸、甲硫氨酸 E．天冬氨酸和天冬酰胺
2．tRNA分子上结合氨基酸的序列是B
A．CAA-3′ B．CCA-3′ C．AAC-3′ D．ACA-3′ E．AAC-3′ 3．遗传密码E
A．20种氨基酸共有64个密码子 B．碱基缺失、插入可致框移突变 C．AUG是起始密码 D．UUU是终止密码
E．一个氨基酸可有多达6个密码子
4、tRNA能够成为氨基酸的转运体、是因为其分子上有A A．-CCA-OH 3′末端 B．3个核苷酸为一组的结构 C．稀有碱基 D．反密码环 E．假腺嘌吟环
5、蛋白质生物合成中的终止密码是( ADE )。
（A）UAA （B）UAU （C）UAC （D）UAG （E）UGA 6、Shine-Dalgarno顺序(SD-顺序)是指:（ A ） A.在mRNA分子的起始码上游8-13个核苷酸处的顺序 B.在DNA分子上转录起始点前8-13个核苷酸处的顺序
C.16srRNA 3’端富含嘧啶的互补顺序 D.启动基因的顺序特征
7、反密码子中哪个碱基对参与了密码子的简并性(摇摆)。（ A ） （A）第一个 (B)第二个 (C)第三个 (D) 第一个与第二个 8、真核与原核细胞蛋白质合成的相同点是（C ） （A）翻译与转录偶联进行 （B）模板都是多顺反子 （C）都需要GTP
（D）甲酰蛋氨酸是第一个氨基酸
以大肠杆菌为例 ，简述蛋白质生物合成过程。 答: 氨基酸的活化 翻译的起始 肽链的延伸 肽链的终止
新生多肽链的折叠与加工
遗传密码有什么特性？ 答；简并性
普遍性与特殊性 连续性 摆动性
有几种终止密码子？他们的序列和别名是什么？
3种 UAG、UGA、UAA 简述摆动学说？
答：转运氨基酸的tRNA上的反密码子需要通过碱基互补与mRNA上的遗传密码子反向配对结合，在密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，这种现象称为密码子的摆动性。 第五章
简述实时定量PCR的原理和过程
答：原理：是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
实时定量PCR反应在带透明盖的塑料小管中进行，激发光可以直接透过管盖，使其中的荧光探针被激发。荧光探针事先混合在PCR反应液中，只有与DNA结合后，才能被激发出荧光。
简述基因组 DNA 文库的构建流程。
答：基因组 DNA 文库的构建程序包含 5 个部分： ① 载体的制备；
② 高纯度大分子量基因组 DNA 的提取；
③高分子量 HMW DNA 的部分酶切与脉冲电泳分级分离（PFGE size selection）； ④ 载体与外源片段的连接与转化； ⑤ 重组克隆的挑取和保存。
蛋白质组学的研究对象和目的是什么？主要有哪些技术和方法？
答：蛋白质组学的研究对象是在大规模水平上研究蛋白质的特征，研究对象包括蛋白质的表达水平，翻译后的修饰，蛋白与蛋白相互作用等，目的是由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生，细胞代谢等过程的整体而全面的认识 。 双向电泳 western印迹法 蛋白质的质谱分析技术
真核细胞mRNA的哪一结构特征可用来分离纯化mRNA？请设计实验分离纯化真核细胞mRNA。
答：mRNA分子最显著的结构特征：5ˊ-m7G帽子，3ˊ-poly尾巴；实验中常用寡聚(dT)-纤维素柱色谱法纯化mRNA。
1、利用mRNA 含有3ˊ-poly尾巴，当RNA流经寡聚(dT)-纤维素柱时，mRNA被特异性的结合在柱上；
2、然后用低盐溶液或蒸馏水洗脱mRNA；
Promega公司的polyAT Tract mRNA分离系统：将生物素标记的寡聚dT与细胞总RNA温育，再加入微磁球相连的抗生物素蛋白以结合polyA mRNA,通过磁场吸附作用将polyA mRNA从总RNA中分离。 第六章
简述酵母单杂交系统的主要原理。
答：研究DNA-蛋白质之间相互作用的新技术，可识别稳定结合于DNA上的蛋白质，在酵母细胞内研究真核生物中DNA-蛋白质之间的相互作用，并通过筛选DNA文库直接获得靶序列相互作用蛋白的编码基因。
酵母双杂交系统（Yeast two-hybrid system）
将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和GAL4激活结构域基因，构建成融合表达载体，从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统。
基因敲除：（gene knock-out）又称基因打靶：
通过外源DNA与染色体DNA之间的同源重组，进行精确的定点修饰和基因改造，具有 专一性强、染色体DNA可与目的片段共同稳定遗传等特点。 基因敲除分为： 完全基因敲除
条件型基因敲除（又称不完全基因敲除）
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