α-甘露糖苷酶研究进展

２００６年１１月　中国比较医学杂志　ＣＨＩＮＥＳＥ　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＣＯＭＰＡＲＡ１ＴＶＥ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　Ｎｏｖｅｍｂｅｒ，２００６　ＶｏＩ．１６　Ｎｏ．１ｌ　第ｌ６卷第１１期　综述与专论￥　甘露糖苷酶研究进展　刘红霞，苏　卫，张连峰　（中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所，北京１０００２１）　【摘要】　Ｎ一糖基化是机体蛋白质翻译后的一种重要的修饰过程。蛋白质Ｎ一糖基化生物过程和相关的许多酶　主要定位于胞浆内质网和高尔基体。ａ一甘露糖苷酶是一种参与糖蛋白合成和代谢的重要蛋白酶，它的功能是修剪　Ｎ一聚糖中的甘露糖。本文重点介绍ａ一甘露糖苷酶的分类、在体内参与糖蛋白的成熟和降解过程，以及ａ一甘露糖苷　酶基因突变可导致的相关疾病。　【关键词】蛋白质；糖基化；甘露糖苷酶　【中图分类号】Ｒ３４９．６３　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１６７１—７８５６（２００６）１１－０６９７—０６　Ａｄｖａｎｃｅｍｅｎｔ　ｉｎ　—ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ　ＬＩＵ　Ｈｏｎｇ—ｘｉａ，ＳＵ　Ｗｅｉ，ＺＨＡＮＧ　Ｌｉａｎ—ｆｅｎｇ　（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ａｎｉｍａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　ａｎｄ　Ｐｅｋｉｎｇ　Ｕｎｉｏｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００２１，Ｃｈｉｎａ）　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｎ—ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｉｓ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｐｏｓｔ—ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ　ｍｏｄｉｆｙｉｎｇ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｉｎ　ｏｒｇａｎｉｓｍ．Ｔｈｅ　ｒｅａｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｎ—ｇｉｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ　ｐａｔｈｗａｙ　ｏｃｃｕｒ　ａｌｏｎｇ　ｔｈｅ　ｓｅｃｒｅｔｏｒｙ　ｐａｔｈｗａｙ　ａｎｄ　ｍｏｓｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｎｔａｉｌ　ｅｎｚｙｍｅｓ　ｌｏｃａｌｉｚｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ　ｅｔｒｉｃｕｌｕｍ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｇｏｌｇ￣ｂｏｄｙ．Ｔｈｅ　ａ—ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ　ｉｓ　ａ　ｋｅｙ　ｅｎｚｙｍｅ　ｏｆ　Ｎ—ｇｌｙｃａｎ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，ｗｈｉｃｈ　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｒｅｍｏｖｉｎｇ　ｔｈｅ　ｍａｎｎｏｓｅ　ｒｅｓｉｄｅ　ｏｆ　ｇｌｙｃａｎ．Ｔｈｉｓ　ｒｅｖｉｅｗ　ｗｉｌｌ　ｆｏｃｕｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｉｓ　ｅｎｚｙｍｅ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ　ｎｄ　ｄｅｇｒａｄａｔｉａｏｎ　ｏｆ　Ｎ—ｇｌｙｃａｎ，ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｒｅｓｕｌｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｉｔ’Ｓ　ｍｕｔａｔｉｏｎ．　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】Ｐｒｏｔｅｉｎ；Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ；Ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ　蛋白质的Ｎ一糖基化是在进化上一个高度保守　蛋白在体内的寿命以及糖蛋白将在何组织中降解也　起着关键作用。尤其是近年来发现，糖蛋白中的糖　链参与细胞识别与分子识别，因此称糖蛋白中的糖　链为信息分子。糖链是继核酸链与蛋白质链之后，　学者们深入研究与生命活动息息相关的第三链。因　此，可以认为，“蛋白质一糖类”是基因信息传递的延　续。　的代谢过程，对于所有的真核生物的生长发育都是　必不可少的。它是蛋白质翻译后的一种重要的加工　过程，在肽链生物合成的同时或合成以后，在酶的　催化下糖链被连接到肽链上的特定糖基化位点，称　为蛋白质糖基化，它的功能是通过修饰此糖基化位　点连接的寡糖链结构而完成的。就单个糖蛋白来　说，寡糖结构不仅影响所连接多肽的生物活性、折　蛋白质Ｎ一糖基化由多种酶调控，不同的类型的　叠、定位、免疫原性　，而且限定了糖基结合物和其　他蛋白、大分子复合物甚至细胞之间的黏附性状，如　人类ＡＢＯ血型就是根据红细胞表面寡糖链的差异　来确定的；在整体水平上，Ｎ一寡糖结构不局限于发育　中细胞的黏附作用，也涉及严重的感染、炎症反应、　糖苷酶和糖基转移酶催化蛋白质Ｎ一糖基化的糖修　饰。ａ一甘露糖苷酶是一类关键性糖苷酶，由很多成　员组成。它通过剪切甘露糖残基而在聚糖从高甘露　糖型转化成复合型结构中起重要的作用。本文重点　介绍ａ一甘露糖苷酶的分类、在体内参与糖蛋白的成　熟和降解过程，以及ａ一甘露糖苷酶基因突变可导致　的相关疾病。这些信息将有利于揭示糖链的生物学　激素的活性、关节炎、免疫监视、癌细胞的转移等生　物识别事件…。糖链的存在及其结构的不同，对糖　［作者简介］刘红霞（１９７６一），女，硕士生，主要研究方向：分子遗传学。　［通讯作者］张连峰。　维普资讯 http://www.cqvip.com

６９８　中国比较医学杂志２００６年１１月第ｌ６卷第１１期　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｃｏｍｐ　Ｍｅｄ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２００６，Ｖｏ１．１６．Ｎｏ．１１　功能和相关疾病的分子遗传机制。　１乜－甘露糖苷酶的分类　在Ｎ．糖基化过程中所涉及的甘露糖苷酶，见图　１，依据它们所催化水解键位的不同主要可分为ａ．甘　露糖苷酶和８．甘露糖苷酶，它们分别参与甘露糖ａ．　１，２、ａ．１，３、ａ．１，６和８１．４糖苷键的水解过程　。迄　今为止，已克隆的ａ．甘露糖苷酶ｃＤＮＡ有二十多种，　其中来自人类的有６种ｂ］。ａ．甘露糖苷酶主要存在　于内质网、高尔基体、溶酶体和胞浆其它细胞器　中　，功能是剪接寡糖结构末端不同连接的甘露糖　残基，形成高甘露糖型、复杂型、杂合型的Ｎ．寡糖。　依据底物特异性、酶分子量大小、保守序列的结构域　及对生物碱抑制作用的敏感性，Ｍｏｒｅｍｅｎ于１９９４年　把已经发现的ａ．甘露糖苷酶分成Ｉ类和Ⅱ类两大　类　。　１．１　Ｉ类　Ｉ类ａ．甘露糖苷酶分子中有糖基水解酶家族　４７（ｇｌｙｅｏｓｙｌｈｙｄｒｏｌａｓｅ　ｆａｍｉｌｙ　４７）保守序列，相对分子质　量为６３．７３ＫＤａ，特异的作用于甘露糖ａ．１，２糖苷键，　脱氧野尻霉素（ｄｅｏｘｙｍａｎｎｏｊｉｒｍｙｅｉｎ　ｄＭＮＪ）和基夫碱　（ｋｉｆｕｎｅｎｓｉｎｅ）对此类酶有抑制作用，酶的催化作用　对钙离子具有依赖性，主要存在酵母和哺乳动物　中　。　根据酶的不同特性、亚细胞定位和底物特异性，　在哺乳动物中已发现了数种ａ．１，２甘露糖糖苷　酶　。Ｉ类ａ．甘露糖苷酶主要位于内质网和高尔基　体。内质网的ａ．１，２甘露糖苷酶可将底物甘露糖。Ｎ．　乙酰葡糖胺　（Ｍａｎ。ＧＬｃＮＡｅ　）转换成特异的　Ｍａｎ８ＧＬｃＮＡｅ２（甘露糖８Ｂ，ｍａｎ８Ｂ）异构体，此Ｍａｎ８结　构是被内质网清除的信号　。大鼠肝脏高尔基的ａ．　甘露糖苷酶可分为Ｉ　Ａ，Ｉ　Ｂ两种，二者均可被ｄ　ＭＮＪ抑制，具有相同的抗原决定簇，对于二糖结构　ｍａｎａ．１，２ｍａｎａ．Ｏ．ＣＨ　具有催化活性，最佳ｐＨ值为　６．０。Ｉ　Ａ分子质量约为５０ＫＤａ，在体外已被纯化；　与Ｉ　Ａ相比较，Ｉ　Ｂ结构不稳定，易被蛋白酶水　解　。在形成Ｍａｎ　ＧＬｃＮＡｅ，高甘露糖核心中，Ｉ　Ａ、　Ｉ　Ｂ的催化底物都是Ｍａｎ９ＧＩ￣ＮＡｅ，，这两个酶的区　别在于生成的中间产物为不同的Ｍａｎ　ＧＩ￣ＮＡｅ　异构　体（甘露糖　Ａ、甘露糖　Ｂ、甘露糖　Ｃ，ｍａｎ　Ａ、ｍａｎ８Ｂ、　ｍａｎ　Ｃ）。ａ．甘露糖苷酶工Ａ作用于Ｍａｎ９ＧＩ￣ＮＡｅ，产　物几乎全部是ｍａｎ８Ａ异构体形式，而ａ．甘露糖苷酶　工Ｂ生成ｍＢｎ　Ａ和ｍａｎ　Ｃ异构体混合物。Ｉ　Ａ、Ｉ　Ｂ　随后修剪第一个甘露糖残基，形成Ｍａｎ　ＧＬｃＮＡｅ　一　Ｍａｎ６ＧＩ￣ＮＡｅ，　ＭａｎＥＧＬｃＮＡｃ，。当有ｍａｎ８Ｂ存在时，　Ｉ　Ａ，Ｉ　Ｂ以同等的比例修剪图１中Ｇ和Ｋ位上的　残基生成Ｍａｎ６ＧＬｃＮＡｅ２　。　ｃａ２　依赖的ａ．１，２甘露糖糖苷酶属于多基因家　族。在酵母中此酶为ｃａ２　依赖性，位于内质网上，　可以被ｄＭＮＪ抑制¨　。目前该基因已被分离，编码　分子量为６３ＫＤ的Ⅱ型跨膜蛋白，此蛋白有三个糖　基化位点，一个ｃ　结合共同序列和一个作为跨膜　区域的非剪切信号序列，所衍生的氨基酸序列与兔、　小鼠、人的ｅＤＮＡ编码的不同的甘露糖苷酶有３６％　的同源性和５８％的相似性。它与哺乳动物位于ＥＲ／　胞浆的ｃａ２　依赖的ａ．１，２甘露糖糖苷酶未发现有显　著同源性　。在哺乳动物中，ｃａ２　依赖的ａ．１，２甘　露糖苷酶分子量为５２ＫＤ，可被ｄＭＮＪ抑制，而不被　苦马豆碱（ｓｗａｉｎｓｏｎｉｎｅ）抑制。来源于小鼠的ａ．１，２　甘露糖苷酶是分子量７３ＫＤ的Ⅱ型跨膜蛋白，主要　位于高尔基体，与大鼠高尔基体ａ．１，２甘露糖苷酶　有一定的交叉反应，来源于人的ａ．１，２甘露糖苷酶　分子量为７１ＫＤ，与鼠科动物以及酵母分别具有　８８％和３５％的同源性。　１．２　Ⅱ类　Ⅱ类ａ．甘露糖苷酶异源性较大，相对分子质量　为１０７．１３６ＫＤａ，特异性的修剪ａｌ，２．ａｌ，３．ａｌ，６．甘　露糖苷键，不同亚型的Ⅱ类ａ．甘露糖苷酶的催化活　性可能需要不同的二价阳离子，以芳基化的糖苷如　对硝基苯．ａ．Ｄ．吡喃甘露糖苷（Ｐ．ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙ１．ａ．Ｄ．　ｍａｎｎｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ　ｐＮＰ．ａ．Ｍａｎ）作为底物　。它们主要　包括高尔基ａ．甘露糖糖苷酶Ⅱ、溶酶体酸性ａ．甘露　糖糖苷酶、哺乳动物胞浆／内质网ａ．甘露糖糖苷酶，　其中一些酶的催化活性可以被苦马豆碱抑制，而另　外一些酶（如大鼠肝脏ａ．甘露糖苷酶等）则仅被苦马　豆碱轻度抑制或不抑制　。尽管它们分布在不同的　区域，具有不同的功能，但是它们的氨基酸序列具有　同源性，分子中都含有糖基水解酶家族３８　（ｇｌｙｅｏｓｙｌｈｙｄｍｌａｓｅ　ｆａｍｉｌｙ　３８）的保守序列　。　高尔基体ａ．甘露糖苷酶Ⅱ特异性的剪切　ＧｌｃＮＡ２Ｍａｎ５ＧＬｃＮＡｃ上ａ．１，３、ａ．１，６连接的甘露糖，　已从大鼠脑、肝、绿豆苗分离出此酶，人ａ．甘露糖苷　酶ＩＩ　ｃＤＮＡ与鼠科动物的相近，位于５号染色体　。　分子量约为１３２ＫＤａ，可被苦马豆碱和轮枝链霉菌属　环生物的代谢产物甘露抑制素（ｍａｎｎｏｓｔａｔｉｎ）抑制　。　虽然ａ．甘露糖苷酶Ⅱ普遍被认为位于高尔基体的反　维普资讯 http://www.cqvip.com

中国比较医学杂志２００６年１１月第１６卷第１１期　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｃｏｍｐ　Ｍｅｄ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２００６，Ｖｏ１．１６．Ｎｏ．１１　６９９　面和中间体，但是它们在高尔基体上的具体位置还　取决于不同的细胞类型，在肠上皮位于高尔基体的　反面，而在胰外分泌细胞可能分布于整个高尔基　体¨　。高尔基体ａ一甘露糖苷酶Ⅱ在哺乳动物组织　中分布广泛，但在脑组织中表达水平很低。　ａ一甘露糖苷酶Ⅱ家族中的另一个成员是位于内　质网，胞浆的可溶性ａ一甘露糖苷酶，分子量约　ｌ１６ＫＤ，缺乏跨膜区域和信号序列，催化活性需要　ｃｏ　＋【　；而溶酶体酸性ａ一甘露糖糖苷酶，含有胞浆侧　Ｎ端的信号序列和跨膜区。位于胞浆和溶酶体的ａ一　甘露糖糖苷酶Ⅱ与Ｎ一糖蛋白的分解代谢有关，而与　合成无关　。　１９９７年，从鳞翅类昆虫细胞中克隆了一个ａ一甘　露糖苷酶Ⅱ的ｃＤＮＡ，Ｓｆ９。推导出的氨基酸序列与　高尔基上其他的Ⅱ类ａ一甘露糖苷酶相似，是一完整　的Ⅱ型跨膜蛋白，定位于高尔基体，催化ｐＮＰ心　Ｍａｎ，可被苦马豆碱抑制　。但研究发现ｓｔｇａ一甘露　糖苷酶的功能又和高尔基体ａ一甘露糖苷酶Ⅱ有所不　同，其催化活性需要ＣｏＣｏ　参与，可修剪寡糖上的甘　露糖残基但底物却非Ｍａｎ　ＧＬｃＮＡｃ：，暂时将其命名　为ｓｔｇａ一甘露糖苷酶Ⅲ“　。另一种从大鼠肝脏的高　尔基体和微粒体膜中分离的ａ．甘露糖苷酶被命名为　ａ．甘露糖苷酶Ⅲ，可特异性的剪切ＧＬｃＮＡｃ，Ｍａｎ　，产　生ＧＬｃＮＡｃ２Ｍａｎｌ一４　ＧＬｃＮＡｃ２，需要Ｃｏ２ｏ　的催化，可被　苦马豆碱轻度抑制。当高尔基体ａ一甘露糖苷酶Ⅱ缺　陷或不足时，可以利用此酶通过替代途径来合成部　分Ｎ一糖蛋白“　。在研究先天性红细胞形成不良疾　病或在ａ一甘露糖苷酶Ⅱ缺陷的模型动物中发现可能　有ａ一甘露糖苷酶Ⅱ亚型的存在，也具有ａ一甘露糖苷　酶Ⅱ酶的活性，在骨骼肌中高表达，将其命名为ａ一甘　露糖苷酶Ⅱ“　，目前并不清楚这几种酶是否与前面　描述的大鼠ａ．１，２／１，３／１，６甘露糖苷酶相同以及其　在Ｎ一聚糖成熟过程中的作用。　基于ｃＤＮＡ克隆对这些酶所作的氨基酸序列分　析，不但支持把ａ一甘露糖苷酶分成上述两大类，还　把第Ⅱ类ａ．甘露糖苷酶分成三个亚类。它们分别命　名为ＭＡＮ２Ａ，ＭＡＮ２Ｂ，ＭＡＮ２Ｃ，在人类，已发现并被　命名的ＭＡＮ２Ａ酶有ＭＡＮ２Ａ１（Ｇｏｌｇｉａ—ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅⅡ）　和ＭＡＮ２Ａ２（Ｇｏｌｇｉａ—ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅⅡ　），ＭＡＮ２Ｂ酶有　ＭＡＮ２Ｂ１（溶酶体ａ—ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ）和ＭＡＮ２Ｂ２（猪的　１３５ＫＤ的ａ—Ｄ—ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ的人源性同系物），而　ＭＡＮ２Ｃ酶只有ＭＡＮ２Ｃ１（６Ａ８ａ一甘露糖苷酶）　ｊ。　２甘露糖苷酶在糖基化过程中的作用　Ｎ．糖基化是在内质网上由糖基转移酶催化，在　内分泌蛋白和膜结合蛋白的天冬酰氨残基的氨基上　结合寡糖的过程，即在粗面内质网的核糖体上合成　蛋白肽链的同时，一旦形成天冬氨酸一ｘａａ．色氨酸一／　丝氨酸（Ａｓｎ—Ｘａａ—Ｓｅｒ／Ｔｈｒ，Ｘａａ为除脯氨酸外的所有　氨基酸残基）三联序列子密码，即糖基化位点，才　有可能开始糖基化，随着肽链进入内质网腔，Ｎ一糖链　可被位于内质网腔膜结构上的加工酶修剪、加工成　高甘露糖型，再进入高尔基体，继续被膜结构上的酶　加工合成“　。少数情况下天冬氨酸一Ｘａａ一半光氨酸　（Ａｓｎ—Ｘａａ—Ｃｙｓ）序列也作为糖基化位点¨　。Ｎ一糖基　化的过程中涉及多种酶的参与，主要是糖酰基转移　酶和糖苷酶两大类，前者负责将活性供体（通常是　ＮＤＰ一糖）的单糖部分转移至接纳体物质如糖、蛋白　质和脂等分子上；后者的催化活性是修剪糖蛋白糖　链上的各种糖基，二者共同完成Ｎ．糖基化。下面主　要概述了糖苷酶中ａ　甘露糖苷酶（ａ　ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ）的　些特性。不同的类型ａ．甘露糖苷酶的功能是修剪　糖蛋白糖链中不同连接的甘露糖基¨　，如图ｌ所　示。它不仅是Ｎ一聚糖的成熟所必须的，而且也参与　它的降解过程。　２．１成熟阶段　在Ｎ一聚糖成熟的过程中，ａ一甘露糖苷酶在不同　阶段发挥了重要的作用“。。最初，长萜醇连接的寡　糖前体是葡萄糖３甘露糖。Ｎ一乙酰葡糖胺，　（ＧＬｃ，Ｍａｎ　ＧＬｃＮＡｃ　）（图１），与新合成的多肽链上的　Ａｓｎ—Ｘａａ—Ｓｅｒ／Ｔｈｒ序列上，接下来ＧＬｃ　Ｍａｎ。ＧＬｃＮＡｃ，　远端的三个葡萄糖基经特异的葡萄糖苷酶剪切掉，　几个内质网和高尔基ａ．１，２甘露糖苷酶去除四个甘　露糖后的产物是Ｍａｎ　ＧＬｃＮＡｃ　核心。在此途径中，　ａ—ｌ，２甘露糖苷酶的活性对于各型Ｎ．糖蛋白成熟是　必须的，Ｍａｎ　ＧＬｃＮＡｃ　被Ｎ一乙酰葡糖胺转移酶Ｉ修　饰，连接一个Ｎ一乙酰葡萄糖，形成了杂合型或复杂　型的寡糖。随后，寡糖被运输到高尔基体的腔面。经　高尔基体ａ．甘露糖苷酶Ⅱ剪切ＧＬｃＭａｎ　ＧＬｃＮＡｃ，上　ａ—ｌ，３和ａ—ｌ，６连接的甘露糖残基，形成　ＧＬｃＭａｎ，ＧＬｃＮＡｃ：。最后，各种糖酰基转移酶把相应　的单糖转运至该寡糖结构中分支糖链的末端，生成　了组成与结构十分复杂的成熟的Ｎ．聚糖，被转运至　特定的组织和器官发挥生理功能　。　２．２降解阶段　ａ一甘露糖苷酶不仅在糖蛋白的形成过程中发挥　维普资讯 http://www.cqvip.com

７００　中国比较医学杂志２００６年１１月第１６卷第１１期Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｃｏｍｐ　Ｍｅｄ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２００６，Ｖｏ１．１６．Ｎｏ．１１　重要的作用，而且也参与糖蛋白在溶酶体的降解过　程。在内质网中不能成为正常构型的蛋白质，如未　折叠的、变异的蛋白以及多聚体的亚单位或某些异　源性表达的蛋白质，在内质网被选择性的降解　。　糖蛋白被转运至溶酶体内，在适宜的酸性ｐＨ值下，　经一系列的水解酶对糖蛋白进行分解，溶酶体的　甘露糖苷酶对核心五糖上ａ．１，３和ａ．１，６糖苷键连　接的甘露糖苷残基进行剪切　，修剪的产物可被再　糖基化（ｒｅｇｌｙｃｏｌａｔｉｏｎ）或作为合成寡糖的供体。　２．３量化的控制　在糖蛋白成熟过程中，寡糖在被运至高尔基体　之前，在内质网中存在着一个糖蛋白的量化控制机　制　，即未折叠或折叠不正确的多肽的去糖基化　Ⅱ，Ⅲ　△ｇｌｕｃｏｓｅ蕾一－　ｏ　ｉｌｌａＯｏｏｓｅ甘露糖　ｏ　ＧＬＣｉ￣ＩＲｃ　ｌ卜乙ｔ＿－歧　图１真核生物Ｎ一连接寡糖成熟及降解过程中的甘露糖　基的修剪。内质网的ｎ一甘露糖苷酶Ｉ／Ⅱ（ＥＲ　ａ－ｍａｎ　Ｉ／　Ⅱ），内源性ｎ．甘露糖苷酶（Ｅｎｄｏ　ｎ．ｍａｎ），Ｍａｎ９ＧＬｃＮＡｃ２寡　糖结构特异的ｎ．甘露糖苷酶（ｍａｎ９．ｍａｎ）；高尔基体ｎ．甘露　糖苷酶Ｉ，１Ｉ／ｍ（Ｇｏｌｇ￣ｎ．ｍａｎ　Ｉ／１Ｉ／ｍ）和溶酶体ｎ．甘露糖　苷酶（１ｙｓｏｓｏｍａｌ　ｎ．ｍａｎ）参与真核生物Ｎ．连接寡糖成熟及降　解过程中的甘露糖基的修剪过程。　Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｒｅｍｏｖｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍａｎｎｏｓｅ　ｒｅｓｉｄｅｓ　ｉｎ　ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ　ｏｒｇａｎｉｓｍ．Ｎ—ｌｉｎｋｅｄ　ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．ＥＲ　ｎ．ｍａｎ　Ｉ／ＩＩ（ＥＲ　ｎ．ｍａｎ　Ｉ／１Ｉ），　ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ　ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ　ｎ—ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅｓ（Ｅｎｄｏ　ｎ—ｍａｎ），　ｍａｎｎｏｓｅ９．ｓｐｅｃｉｉｆｃ　ｎ．ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ（ｍａｎ９一ｍａｎ），　Ｇｏｌｇｉ　ｎ—　ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅｓ　Ｉ／１Ｉ／ｍ（Ｇｏｌｇｉ　ｎ．ｍａｎ　Ｉ／１Ｉ／ｍ）ａｎｄ　ｌｙｓｏｓｏｍａｌ　ｎ—　ｍａｎ：ｌｙｓｏｓｏｍａｌ　ｎ—ｍａｎｎ０ｓｉｄａｓｅ（１ｙｓ０ｓ０ｍａｌ　ｍａｎ）ａｒｅ　ｉｎｖｏｌｖｅｄ　ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐｒｏｃｅｓｓ．　（ｄｅｇｌｙｃｏｌａｔｉｏｎ）和再糖基化　，在此过程中，再糖基　化时加入葡萄糖的甘露糖基并不能被内质网的甘露　糖苷酶所剪切，在某些细胞中，这个甘露糖基可能在　糖基化循环结束时，被高尔基体的内源性甘露糖苷　酶（ｅｎｄｏｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ）剪切，从而在糖蛋白离开内质网　之前，大大增加了再次糖基化的机会　，实现蛋白　质糖基化的量化控制．　３　甘露糖苷酶相关疾病　到目前为止，人类已发现了九种疾病与糖基化　过程有关，它们都属于常染色体隐性遗传病　。Ｎ．　糖基化成熟和降解过程中每一个糖基的修剪都是由　特异的酶所催化，其中任一环节的酶缺乏或不足，都　可导致细胞内和分泌糖蛋白的糖基化不全　（ｕｎｄｅｒｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ），产生先天性糖基化功能紊乱　（ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ　ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ　ｏｆ　ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎｓ，ＣＤＧｓ）的病理症　状　。目前发现的由ａ．甘露糖苷酶发生障碍导致　的疾病有先天性红细胞生成异常性贫血Ⅱ型　（ｃｏｎｇｅｎｉｔｌａ　ｄｙｓｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｃ　ａｎｅｍｉａ　ｔｙｐｅ　ＩＩ，ＨＥＭＰＡＳ）　和甘露糖苷贮积症（ａ．Ｍａｎｎｏｓｉｄｏｓｉｓ）　Ｊ。　３．Ｉ　先天性红细胞生成异常性贫血Ⅱ型　（ＨＥＭＰＡＳ）　ＨＥＭＰＡＳ是一种常染色体隐性疾病，以红细胞　生成障碍、骨髓红细胞多形核、红细胞膜异常和组织　铁质沉着病为主要特征　。病人由轻度贫血发展　到严重贫血过程中常伴随肝脾肿大，也常见有黄疸、　结石、糖尿病的报道　。该疾病是由于Ｎ．糖蛋白成　熟过程中，骨髓红细胞系中两个称为带３和带４．５　的红细胞膜糖蛋白发生异常所致。正常情况下，这　两个糖蛋白是双天线杂合型寡糖，每个分支上具有　多聚乳糖胺（ｐｏｌｙｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ）结构。在严重的　ＨＥＭＰＡＳ病人，这些糖蛋白上出现的是没有多聚乳　糖胺的杂合型寡糖结构；症状轻微的病人，却在细胞　表面的糖脂上连接有多聚乳糖胺结构，可能与高尔　基体ａ．甘露糖苷酶Ⅱ　的存在有关。在对意大利南　部ＨＥＭＰＡＳ家族的研究中，发现有Ｎ一乙酰葡萄胺转　移酶Ⅱ和高尔基体ａ．甘露糖苷酶Ⅱ水平的减少　。　为了研究高尔基体ａ一甘露糖苷酶Ⅱ在ＨＥＭＰＡＳ疾病　中的意义，已经建立了高尔基体ａ．甘露糖苷酶Ⅱ基　因敲除小鼠模型，发现此小鼠模型具有ＨＥＭＰＡＳ病　人的许多特征　。可以通过此模型来了解高尔基　体ａ．甘露糖苷酶Ⅱ的生物学性状，寻找治疗或缓解　ＨＥＭＰＡＳ症状的途径。　３．２　ａ．甘露糖苷贮积症（ａ．Ｍａｎｎｏｓｉｄｏｓｉｓ）　ａ．Ｍａｎｎｏｓｉｄｏｓｉｓ是一种溶酶体贮积功能紊乱，表　现为含有寡糖结构的甘露糖过多地蓄积于多种外周　维普资讯 http://www.cqvip.com

中国比较医学杂志２００６年１１月第１６卷第１１期　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｃｏｍｐ　Ｍｅｄ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２００６，Ｖｏ１．１６．Ｎｏ．１１　７０１　组织和大脑的溶酶体中，是由于溶酶体的Ｑ－甘露糖　苷酶不足或缺乏所致。此疾病可以在人、牛、猫中发　生。正常糖蛋白和折叠不正确的糖蛋白的降解都发　生在溶酶体，当溶酶体的ａ．甘露糖苷酶（１ｙｓｏｓｏｍａｌ　ａｃｉｄ　ａ．ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ　ＬＡＭＡＮ）功能发生障碍时，这些寡　糖的非还原端的ａ１，２．，ａ１，３．和ａｌ，６连接的甘露糖　残基得不到修剪，引起大量的寡糖在溶酶体蓄　积　Ｊ。ａ．甘露糖苷贮积症的临床表现广泛，如神经　发育不全、骨发育不全、面部粗糙、听力障碍、反复感　染、肝脾肿大等症状　。在进行高尔基体ａ．甘露糖　苷酶Ⅱ相关研究时，运用了天然产物生物碱抑制剂　苦马豆碱，该化合物可以引起“枯草病”，它和溶酶体　ａ．甘露糖苷酶上靶点特异性结合，引起溶酶体内寡　糖的大量蓄积，形成ａ．Ｍａｎｎｏｓｉｄｏｓｉｓ的模拟表现¨ｊ。　目前ａ．Ｍａｎｎｏｓｉｄｏｓｉｓ的治疗方法是酶替代疗法和骨　髓移植，但都有一定的局限性　。　此外，两侧脑室结节异位（ｂｉｌａｔｅｒａｌ　ｐｅｒｉｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ　ｎｏｄｕｌａｒ　ｈｅｔｅｒｏｔｏｐｉａ，ＢＰＮＨ）和两侧室多小脑回　（ｂｉｌａｔｅｒｌａ　ｐｅｒｉｓｙｌｖｉａｎ　ｐｏｌｙｍｉｃｒｏｇｙｒｉａ，ＰＭＧ），可能是两　个基因ｔ（１；６）（ｐ１２；ｐ１２．２）的平衡易位所致，使ａ．甘　露糖苷酶Ｉ　Ａ（ＭＡＮ１Ａ２）和谷光甘肽硫转移酶基因　（ＧＳＴＡ２）被中断。ＢＰＮＨ虽具有正常的智力，但常有　癫痫发作，还伴有血管系统的并发症，如动脉导管未　闭。ＰＭＧ主要表现为，智力迟钝，癫痫，假性延髓性　麻痹，引起语言表达和进食障碍。通过发病家族成　员发病候选基因和序列的分析，发现ａ．甘露糖苷酶　Ｉ　Ａ（ＭＡＮ１Ａ２）是ＢＰＮＨ和ＰＭＧ的一个强有力的候　选基因，ａ．甘露糖苷酶Ｉ　Ａ位于高尔基体上，特异修　剪糖基化中Ｍａｎ９ＧｌｃＮＡｃ，上的ａ．１，２连接的甘露糖　基，产生Ｍａｎ９ＧｌｃＮＡｃ，结构，Ｎ．聚糖分支的起始部分　的破坏将影响到生长发育，包括脑的发育。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　ｂｌｏｔ显示ＭＡＮ１Ａ２基因在胚胎和睾丸高表达，作为　致病基因的确定还需要作大量的基因突变分析研　究　。　细胞和整体动物在糖基化过程中都有可能发生　遗传失常，例如：培养细胞的糖基化遗传失常、自发　性糖基化遗传失常、个体发生和细胞活化中的糖基　化改变、癌的糖基化改变等，导致聚糖功能的改变或　疾病的产生。此外，尚有多种疾病与后天获得性的　糖基化改变和（或）聚糖识另『Ｊ改变有关。　结束语　人类基因组中大约有１％的基因用来保持和处　理细胞的糖基化过程。加　。糖蛋白的成熟发生在内　质网和高尔基体，它的降解主要在溶酶体发生，发生　过程中许多相应的酶已陆续被克隆。糖基化合成的　起始步骤（内质网）在所有真核生物中都是相似的，　在进化上高度保守；而在高尔基体发生过程中所涉　及的ａ．甘露糖苷酶种类似乎过于繁多，陆续有新酶　被发现，对于它们在糖基化过程中的位置、功能等生　物学特性尚不清楚。我们目前研究的，朱立平研究　组克隆的６Ａ８ａ．甘露糖苷酶属于Ⅱ类ａ．甘露糖苷　酶，体外试验已经发现在Ｂ淋巴细胞、鼻烟癌细胞　株以及细胞凋亡方面均具有生物学活性　Ｊ。在ａ．甘　露糖苷酶Ⅱ缺陷小鼠模型中，发现了糖蛋白合成的　替代途径，它是由新的ａ．甘露糖苷酶１Ｉ　ｘ执行的，同　时也发现改变寡糖的生理合成，会引起自身免疫功　能紊乱，提示自然人群中的自身免疫疾病可能与寡　糖的合成有关。通过揭示这些酶在糖基化过程中的　不同时间和不同空间的表达，将有助于理解寡糖结　构在生长发育中的角色，也有助于阐明糖基化相关　疾病的分子机制，提供有效的治疗方法或药物治疗　的靶点。　参考文献：　［１］Ｍｏｒｅｍｅｎ　ＫＷ．Ｇｏｌｓｉ　ａ－ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ　ＩＩ　ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｉｎ　ｖｅｒｔｅｂｒａｔｅ　ｓｙｓ．　ｔｅｌｌ￣：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ａｓｐａｒａｇｉｎｅ－ｌｉｎｋｅｄ　ｏｌｉｇｏｓａｅｃｈａｒｉｄｅ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｉｎ　ｍａｎｕｎａｌｓ［Ｊ］．Ｂｉｃｏｈｉｍ　Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ａｃｔａ，２００２，１５７３：２２５—２３５．　［２］Ｈｉｒｓｃｈ　Ｃ，Ｂｌｏｍ　Ｄ．Ｐｉｎｅ　ｓｈ　ＨＬ．Ａ　ｒｏｌｅ　ｆｏｒ　Ｎ—ｇｌｙｃａｎａｓｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｙ—　ｔｓｏｏｌｉｃ　ｔｕｒｎｏｖｅｒ　ｏｆ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓ［Ｊ］．ＥＭＢＯ，２００３，２２：１０３６—　１０４６．　【３　Ｊ　Ｌｉ　Ｂ，Ｗａｎｇ　ＺＺ，Ｍａ　ＦＲ，ｅｔ　ａ１．Ｃｌｏｎｉｎｇ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａ—ｃｔｅｒ－　ｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｃＤＮＡ（６Ａ８）ｅｎｃｏｄｉｎｇ　ａ　ｎｅｗ　ｈｕｍａｎ　ａ－ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ［Ｊ］．　Ｅｕｒｏｐ　Ｊ　Ｂｉｃｏｈｅｍ，２０００，２６７：７１７６—７１８２　【４　Ｊ　Ｋｏｒｎｆｅｌｄ　Ｒ，Ｋｏｒｎｆｅｌｄ　Ｓ．Ａｓｓｅｍｂｌｙ　ｏｆ　ａｓｐａｒａｇｉｎｅｓ－ｌｉｎｋｅｄ　ｏｌｉｇｏｓａｃｃ－　ｈａｒｉｄｅｓ［Ｊｊ．Ａｎｎｕｌ　Ｒｅｖ　Ｂｉｃｏｈｅｍ，１９８５，５４：６３１—６３４．　１　５　ｊ　Ｍｏｒｅｍｅｎ　ＫＷ．Ｔｒｌｎｄａｌｅ　ＲＢ，Ｈｅｒｓｃｏｖｉｃｓ　Ａ．Ｇｌｙｃｏｓｉｄａｓｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｓ—　ｐａｒａｇｉｎｅ－ｌｉｎｋｅｄ　ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏ—　ｇＹ．１９９４，４：１１３—１２５．　［６］　Ｋｕｋｕｒｕｚｉｎｓｋａ　ＭＡ，Ｌｅｎｎｏｎ　Ｋ．Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｎ—ｇｌｕｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ：ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ［Ｊ］Ｃｒｉｔ　Ｒｅｖ　Ｏｒａｌ　Ｂｉｏｌ　Ｍｅｄ，１９９８，９（４）：４１５　４４８．　［７］Ｈｅｒｓｃｏｖｉｃｓ　Ａ．Ｇｌｙｃｏｓｉｄａｓｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｓｐａｒａｇｉｎｅ－ｌｉｎｋｅｄ　ｏｌｉｇｏｓａｅｃｈａｒｉｄｅ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｐａｔｈｗａｙ［Ｍ］．Ｉｎ：Ｐｉｎｔｏ　ＢＭ　Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ　Ｎａｔｕｒａｌ　Ｐｒｏｄ－　ｕｃｔｓ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ａｍｓｔｅｒｄａｍ：Ｅｌｓｅｖｉｅｒ．１９９８．　［８］　Ｒｉｚｚｏｌｏ　１３，Ｋｏｒｎｆｅｌｄ　Ｒ．Ｐｏｓｔ．ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｍｏｄｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ　ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ：ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆａｔｔｙ　ａｅｙｌａｓｅ　ａｎｄ　ｄｅｏｘｙｍａｎ－　ｎｏｊｉｉｆｍｙｃｉｎ－ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ－ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｂｉｏｌ　Ｃｈｅｍ，１９８８，　２６３：９５２０—９５２５．　［９］ｕ　Ａ，Ｐａｎｇ　Ｐ，Ｓａｎｄｅｅｐ　Ｋａｌｅｌｋａｒ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ　ｓｐｅｃｉｉｆｃｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　ｍｕｒｉｎｅ　Ｇｏｌｇｉａｌ，２－ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅｓ　ＩＡ　ａｎｄ　ＩＢ　ａｎｄ　ｃｏｍｐａｒｉ·　８ｏｎ　ｗｉｔｈ　ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ　ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ　ａｎｄ　Ｇｏｌｇｌ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ａｌ，２－ｍａｎｎｏｓｉ－　维普资讯 http://www.cqvip.com

７０２　中国比较医学杂志２００６年１１月第ｌ６卷第１１期Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｃｏｍｐ　Ｍｅｄ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２００６，Ｖｏ１．１６．Ｎｏ．１１　ｄａｓｅｓ［Ｊ］．Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９８，８（１０）：９８１—９９５．　［１Ｏ］　ＨｅｒｓｃｏｖｉｃｓＳｇ　Ａ，ＳｃｈｎｅｉｋｅｒｔＳ　Ｊ，Ａｒｉａｄｎｉ　ＡｔｈａｎａｓｓｉａｄｉｓＳ　Ａ，ｅｔ　ａ１．　Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　Ｍｏｕｓｅ　ＧｅＭ　Ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ　ｃＤＮＡ，ａ　Ｍｅｍｂｅｒ　ｏｆ　ａ　Ｇｅｎｅ　Ｆａｍｉｌｙ　Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｙｅａｓｔ　ｔｏ　Ｍａｍｍａｌｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｂｉｏｌ　Ｃｈｅｍ，２６９　（１３）：９８６４—９８７１．　Ｅｌｂｅｉｎ　ＡＤ．Ｇｌｙｃｅｓｉｄａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ：ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ｏｆ　Ｎ－ｌｉｎｋｅｄ　ｏｌｉｇｓｅａｃ—　ｃｈａｒｉｄｅ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ［Ｊ］．Ｔｈｅ　ＦＡＳＥＢ　Ｊｏｕｒｎａｌ，１９９１，５：３０５５—３０６３　［１２］　Ｄａｎｉｅｌ　Ｐ，Ｗｉｎｃｈｅｓｔｅｒ　Ｂ，ＷａｌＴｅｎ　ＣＤ．Ｍａｍｍａｌｉａｎ　ａ－ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ—　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｆｏｒｍｓ　ｂｕｔ　ａｃｏｍｍｏｎ　ｐｕｒｐｅｓｏ［Ｊ］？Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９４，４：　ｌ１３—１２５．　［１３］　Ｖｅｌａｓｃｏ　Ａ，Ｈｅｎｄｆｉｃｋｓ　Ｌ，Ｍｏｒｅｍａｎ　ＫＷ，ｅｔ　ａ１．Ｃｅｌｌ　ｔｙｐｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｖａｒｉａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｕｂｅｅｌｌｌｕａｒ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ－ｍａｎｎｅｓｉｄａｓｅ—ｌ　ａｎｄ　ＩＩ　ｌＪ　Ｊ．Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌ，１９９３，１２２：３９—５１．　［１４］　Ｊａｒｖｉｓ　ＤＬ，Ｂｏｈｌｍｅｙｅｒ　ＤＡ，Ｌｉａｏ　ＴＦ，ｅｔ　ａ１．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒ—　ｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｃｌａｓｓ　Ｕ　ａｌｐｈａ－ｍａｎｎｅｓｉｄａｓｅ　ｃＤＮＡ　ｆｒｏｍ　ｌｅｐｉｄｏｐｔｅｒａｎ　ｉｎｓｅｃｔ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９７，７：１１３—１２７．　［１５］　Ｆｒｎａｃｉｓ　ＢＲ，Ｐａｑｕｉｎ　Ｌ，Ｗｅｉｎｋａｕｆ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｃｅｓｓ—　ｉ“ｇ　ｏｆ　Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ　ｆｒｕｇｉｅｐｒｄａ　ａ—ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ　ｍ［Ｊ］．Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，　２００２，１２（６）：３６９—３７７．　［１６］　Ｏｇａｗａ　Ｒ，Ｍｉｓａｇｏ　Ｍ，Ｆｕｋｕｄａ　ＭＮ，ｅｔ　１ａ．Ｓｔｒｕｃｔｕｌ￣ａｎｄ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ａ－ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅⅡｘ（ａ－ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅⅡｉｏｓｔｙｐｅ）　ｇｅｎｅ［Ｊ］．Ｅａｒ　Ｊ　Ｂｉｏｃｈｅｍ，１９９６，２４２：４４６—４５３．　［１７］　Ｈｅｒｓｃｏｖｉｃｓ　Ａ，Ｓｃｈｎｅｉｋｅｒｔ　Ｊ，Ａｔｈａｎａｓｓｉａｄｉｓ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｉｏｓｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｍｏｕｓｅ　Ｇｅｌｓ￣ｍａｎｎｅｓｉｄａｓｅ　ｃＤＮＡ．　ａ　ｍｅｍｂｅｒ　ｏｆ　ａ　ｇｅｎｅ　ｆａｍｉｌｙ　ｃｏｎ—　ｓｅｒｖｅｄ　ｆｒｏｍ　ｙｅａｓｔ　ｔｏ　ｍａｍｍａｌｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｂｉｏｌ　Ｃｈｅｍ，１９９４，２６９：９８６４—　９８７１．　［１８］　Ｂｌｏｍ　Ｎ，Ｓｉｃｈｅｆｉｔｚ－Ｐｏｎｔ６ｎ　Ｔ，Ｇｕｐｔａ　Ｒ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｓｔ·　ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ　ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｆｏｒｍ　ｔｈｅ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ［Ｊ］．Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ，２０Ｏ４，（４）：１６３３—１６４９．　［１９］　Ｅｌｂｅｉｎ　ＡＤ．Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｏｆ　Ｎ—ｌｉｎｋｅｄ　ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｃｈａｉｎｓ［Ｊ］．Ａｎｎｕｌ　Ｒｅｖ　Ｂｉｏｃｈｅｍ，１９８７，５６：４９７—　５３４．　［２０］　Ｗｉｎｃｈｅｓｔｅｒ　Ｂ．Ｌｙｓｏｓｏｍａｌ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｏｆ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｓｎ［Ｊ］．Ｇｌｙｃｏｂｉｏ１．　ｏｇｙ，２００５，１５（６）：１Ｒ一１５Ｒ．　［２１］Ｓｕｈ　Ｋ，Ｂｅｒｇｍａｎｎ　ＪＥ，Ｇａｂｅｌ　ＣＡ．Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ　ｏｆｍｏｎｏｇｌｕｃｅｓｙ—　ｌａｔｄｅ　ｈｉｓｈ　ｉｎａｎｎｏ￣ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｂｙ　ａ　ｃｌａｓｓ　ｆｏ　ｍｕｔａｎｔ　ｖｅｓｉｃｕｌａｒ　ｓｔｏ—　ｍａｔｉｔｉｓ　ｖｉｒｕｓ　Ｇ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌ，１９８９，１０８：８１１—８１９．　［２２］Ｔｒｏｍｂｅｔｔａ　ＥＳ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｎ—ｇｌｙｃａｎｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｉｎ　ｈｔｅ　ｅｎｄｏｐｌｓａｍｉｃ　ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ　ｔｏ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ［Ｊ］．Ｇｌｙｃｏｂｉ—　ｏｌｏｇｙ，２００３，１３（９）：７７Ｒ一９１Ｒ．　［２３］　Ｆｒｅｅｚｅ　ＨＨ．Ｕｐｄａｔｅ　ａｎｄ　ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ　ｏｎ　ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ　ｄｉｏｓｒｄｅｒｓ　ｏｆ　ｇｌｙｃｏ·　ｓｙｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００１，１１：１２９Ｒ一４３Ｒ．　［２４］Ｇｒｕｎｅｗａｌｄ　Ｓ，Ｍａｔｔｈｉｊｓ　Ｇ，Ｊａｅｋｅｎ，Ｊ．Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ　ｄｉｏｓｒｄｅｒｓ　ｏｆ　ｇｌｙｃｏ—　ｓｙｌａｔｉｏｎ：ａ　ｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］．Ｐｅｄｉａ￣ｃ　Ｒｅｓ，２００２，５２（５）：６１８—６２４．　［２５］Ｆｕｋｕｄａ　ＭＮ．ＨＥＭＰＡＳ　ｄｉｓｅａｓｅ：ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｅｆｃｅｔ　ｏｆ　ｇｌｙｃｅｓｙｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．　Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９０，１（１）：９一ｌ５．　［２６］　Ｆｕｋｕｄａ　ＭＮ．ＨＥＭＰＡＳ　Ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙ　ｅｒｙｔｈｒｏｂｌｓａｔｉｃ　ｍｕｌｔｉｎｕｃｌｅａｒｉｔｙ　ｗｉｈｔ　ｐｏｓｉｉｔｖｅ　ａｃｉｄｉｉｆｄｅ￣ｌ－ｕｍ　ｌｙｓｉｓ　ｔｅｓｔ　ｌＪ　Ｊ．Ｂｉｏｃｈｉｍ　Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ａｃｔａ，１９９９，　１４５５（２—３）：２３１—２３９．　［２７］　Ｃｈｕｉ　Ｄ，Ｏｈ－Ｅｄａ　Ｍ，Ｌｉａｏ　ＹＦ，ｅｔ　ａ１．Ａｌｐｈａ－ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ－ｌｌ　ｄｅｆｉｃｉｅｎ—　ｃｙ　ｒｅｓｌｕｔｓ　ｉｎ　ｄｙｓｅｒｙｔｈｒｏｐｅｉｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｕｎｖｅｉｌｓ　ａｌｌ　ａｌｔｅｒｎａｔｅ　ｐａｔｈｗａｙ　ｉｎ　ｏｌｉ—　ｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｓｅｉｓ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ，１９９７，９０（１）：１５７—１６７．　［２８］Ｒｏｃｅｓ　ＤＰ，ＩＡｌｌｌｎｌａｎｎ—Ｒａｕｃｈ　Ｒ，Ｐｅｎｇ　Ｊ．Ｅｆｉｆｃａｃｙ　ｏｆ　ｅｎｚｙｍｅ　ｒｅｐｌａｃｅ—　ｍｅｎｔ　ｔｈｅｒａｐｙ　ｉｎ　ａ—ｍａｎｎｏｓｉｄｏｓｉｓ　ｍｉｃｅ：ａ　ｐｒｅｅｌｉｎｉｃａｌ　ａｎｉｍａｌ　ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．　ＨｕｍａｎＭｏｌｃｅｕｌａｒＧｅｎｅｔｉｃｓ，２０Ｏ４，１３（１８）：１９７９—１９８８　［２９］　Ｒａｍａｃｈａｎｄｒａｎ　Ｕ．ａｌｐｈａ－Ｍａｎｎｅｓｉｄｏｓｉｓ：ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｃｌｏｎｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｌｙｓｏ—　ｏｓｍａｌ　ａｌｐｈａ—ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ　ｃＤＮＡ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｍｕｔａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｗｏ　ａｆｆｃｅｔｄｅ　ｓｉｂｌｉｎｇｓ［Ｊ］．Ｈｕｍ　Ｍｏｌ　Ｇｅｎｅｔ，１９９７，６（５）：７１７—７２６．　１３Ｏ　Ｊ　Ｌｅｅｆｌｎａｇ　ＥＰ，Ｍａｒｓｈ　ＳＥ，ＰａｒｒｉｎｉＥ，ｅｔ　ａ１．Ｐａｔｉｅｎｔ　ｗｉｔｈ　ｂｉｌａｔｅｒａｌ　ｅｐｆｉｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ　ｎｏｄｕｌａｒ　ｈｅｔｅｏｒｔｏｐｉａ　ａｎｄ　ｐｏｌｙｍｉｃｒｏｇｙｒｉａ　ｗｉｈｔ　ａｐｐａｒｅｎｔｌｙ　ｂａｌｎａｃｅｄ　ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌ　ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ　ｔ（１；６）（ｐ１２；ｐ１２．２）ｔｈａｔ　ｉｎｔｅｒｒｕｐｔｓ　ｔｈｅ　ｍａｎｎｅｓｉｄａｓｅ　ａｌｐｈａ，ｃｌｓａｓ　１Ａ，ａｎｄ　ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ　Ｓ－ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ　Ａ２　ｇｅｎｅｓ［Ｊ　Ｊ．Ｊ　Ｍｅｄ　Ｇｅｎｅｔ，２００３，４０：１—６．　［收稿日期￣２００６—０３．２４