空气细菌检验作业指导书

章节号：。1 版本/换页:*＊/＊＊ 实验室检验作业指导书 共 2 页 编写日期:＊*年＊*月*＊日 标题：《空气细菌含量检验作业指导书》 一 术语解释：

沉降菌菌落数：规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以个/皿表示。 自然沉降法：指直径90mm的平板计数琼脂培养基在采样点暴露5min,经36℃±1℃、48h培养后，计数生长的细菌菌落数的采样测定方法.

二 检测原理：采用自然沉降法，将直径90mm的平板计数琼脂培养基在采样点暴露5min，经36℃±1℃、48h培养后,计数每个平皿生长的细菌菌落数，得出每个测试点的平均数，以个/皿表示。

三 实验步骤及方法 1试剂和材料

1.1 平板计数琼脂培养基等、无菌生理盐水；参照GB 4789。2-2016配制培养基。

1。2 培养皿、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、无菌培养皿(直径90mm)、天平、无菌吸管、无菌锥形瓶等。

2. 采样(参照GB/T 18204。3-2013） 2.1 采样点:

2.2.1面积小于30平方米的车间,设一对角线，在线上取3点，即中心1点，两端在距墙1米处各取1点；面积大于30平方米的车间，设东、南、西、北、中5个点，其中东、南、西、北均距墙1米。空调出口空气及冷风机出风口（抛光锅）.

2.1。2采样高度:与地面垂直高度80—150CM，距离墙壁不小于100cm。 2。2。3可在关键设备或关键活动范围处增加测点。 2.3。4采样点应避开通风口、通风道等。（特殊要求需标注出相关风口、通道等)

2.2 采样环境条件：采样时关闭 15~30min，记录室内人员数量、温湿度与天气状况等。

2.3 采样方法：用直径为90mm的平板计数琼脂培养基,开盖在采样点上暴露5分钟,合上盖送检

培养。

3 培养：37℃培养48小时。 4 记录

检验报告应包含以下内容：

4。1测试点名称、地址，测试日期；

4。2被测试点的平面位置（必要时标注出测试点相邻的设备、门、窗等影响结果的因素）;

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4。3有关测试方法的描述：包括测试环境、采样点数目及布置图,测试次数等。 5 结果报告:

5.1 用计数方法得出每个培养皿的菌落数

5.2 每个测点的沉降菌评价菌落数的计数，见式：

每个测点平均菌落数（cfu/皿）=（M1+M2+。。。...Mn)/n 6 监测职责、频率及监测标准

6。1对于沉降菌的取样频次，一般情况下化验员可每个月覆盖全车间做一次； 6.1.1如果出现下列情况，可调整并加大检测频率: 6.1.1。1连续超过可接受限度（标准限度）； 6.1.1。2停产较长时间后再开机前； 6.1.1。3关键区域内发现有污染物;

6。1。1。4当生产设备有重大维修或是增加设备； 6.1.1.5当关键区域机构分布有重大变动时。 6.2检测职责

6。2.1 化验员按时做好车间空气质量检测；严格按照作业指导书及相关标准操作,作好记录

并及时填写《不合格通知单》，通知相关人员，分析原因，及时纠正及做好纠正预防措施。 6.2。2按要求做好车间的微生物监控，非食品处理区（检验室、办公室、更衣室消毒室、厕

所等）可按情况检测. 6。3检测标准

6。3。1空气洁净度：air cleanliness class洁净空间单位体积空气中，以大于或等于被考

虑粒径的粒子最大浓度限值进行划分的等级标准。

洁净度级别越低,代表洁净度越高，即浮游菌、细菌、尘埃粒子越少。

中国药品生产洁净室（区）的空气洁净度标准 洁净度级别 尘埃最允许数/平方米 100 10000 100000 300000 微生物最大允许数 浮游菌个/立方米 5 100 500 NA 沉降菌个/皿.30min 1 3 10 15 ≥0。5um 3500 350，000 3，500，000 10，500，000 ≥5um 0 2,000 20,000 61,800 国家药品监督管理局1999年8月1日发布实施

6。3。2参照《药品生产质量管理规范》及本公司产品相关标准，车间洁净度要求如下: 清洁作业区（内包装室等)：5个/皿，5min. 准清洁作业区（制成工段等）：15个/皿，5min. 无菌室：0个/皿，5min。 7、注意事项：

7。1采样后必须尽快对样品进行检验，待检时间不得超过6小时,若样品保存于0-4℃条件下,待检时间不超过24小时。

7。2培养皿用于监测时,为避免培养皿运输或搬动过程造成的影响，应同时进行对照试验，

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每次取一个做对照试验，结果应无菌落生长。

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