布鲁氏菌病血清学诊断靶点的研究进展

中国人兽共患病学报　３２４　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｚｏｏｎｏｓｅｓ　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｃｊｚ　ｊ　ｉｓｓｎ．１００２—２６９４．２０１４．０３．０２２　布鲁氏菌病血清学诊断靶点的研究进展　夏淑婷　（综述），王　鹏　，宋志忠　（审校）　摘　要：布鲁氏菌病是由布鲁氏菌属细菌性引起的一种全世界广泛分布的人兽共患慢性细菌性传染病。人患病后，病程　长，反复发作，长期不愈；且很难通过流行病学和临床症状进行确诊。目前对于布病的诊断方法多采用血清学实验诊断，诊断　方法的核心则是诊断靶点，其决定了诊断的特异性及敏感性。本文就各诊断靶点的研究进展进行综述。　关键词：布鲁氏菌病；血清学诊断靶点；研究进展　中图分类号：Ｒ３７８　５　文献标识码：Ａ　文章编号：１００２—２６９４（２０１４）０３—０３２４—０５　Ａｄｖａｎｃｅｄ　ｏｎ　ｓｅｒｏｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｆｏｒ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ　ＸＩＡ　Ｓｈｕ—ｔｉｎｇ　，ＷＡＮＧ　Ｐｅｎｇ　，ＳＯＮＧ　Ｚｈｉ—ｚｈｏｎｇ。　（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｕｂｌｉｃ　Ｈｅａｌｔｈ，Ｄａｌｉ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｄａｌｉ　６７１０００，Ｃｈｉｎａ；　２．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｅｎｄｅｍｉｃ　Ｄｉｓｅａｓｅ　Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｙｕｎｎａｎ　Ｅｎｄｅｍｉｃ　Ｄｉｓｅａｓｅ　Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｃｏｎｔｒｏｌ。Ｄａｌｉ　６７ｌ０００。Ｃｈｉｎａ）　ＡＢＳＴＲＡＣＴ：Ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ　ｉＳ　ａ　ｋｉｎｄ　Ｏ｛ｃｈｒｏｎｉｃ　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｚｏｏｎｏｔｉｃ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　ｗｉｔｈ　ａ　ｗｉｄｅ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｗｏｒｌｄ　ｃａｕｓｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｇｅｎｕｓ．Ｔｈｅｒｅ　ａｒｅ　ｌｏｎｇ　ｄｕｒａｔｉｏｎ，ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ　ａｎｄ　ｌｏｎｇ—ｔｅｒｍ　ｈｅａｌｉｎｇ　ｗｈｅｎ　ｐｅｏｐｌｅ　ｇｅｔ　ｓｉｃｋ．Ｉｔ　ｉｓ　ｄｉｆｆｉｃｕｌｔ　ｔｏ　ｄｉａｇｎｏｓｅ　ｔｈｒｏｕｇｈ／ｂｙ　ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｙｍｐｔｏｍｓ．Ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｉｓ　ｕｓｅｄ　ｍｏｒｅ　ｃｕｒｒｅｎｔｌｙ　ｗｉｔｈ　ｃｏｒｅ　ｏｆ　ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　ｔａｒｇｅｔｓ　ｗｈｉｃｈ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｓ　ｔｈｅ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ　ｏｆ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ．Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ，ｗｅ　ｓｕｍｍａｒｉｚｅ　ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｐｒｏ—　ｇｒｅｓｓ　ｏｆ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　ｔａｒｇｅｔｓ．　ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：ｂｒｕｃｌｌｏｓｉｓ；ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｔａｒｇｅｔｓ；ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒ：Ｓｏｎｇ　Ｚｈｉ—ｚｈｏｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｓｏｎｇｌ２０８＠１２６．ｃｏｒｎ　布鲁氏菌病（Ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ，简称布病）是一种全　（ＣＦＴ）、酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、胶体金标试　验（ＧＩＣＡ）等近十种　］，血清学诊断操作较为简便，　世界广泛分布的人兽共患慢性细菌性传染病。人间　布病是我国法定乙类传染病，人患病后，累及多种器　官功能，病程较长，久治不愈，严重者丧失劳动和生　活能力。布病防控的关键在于“三早”，“三早”的前　提则是诊断。在布病诊断上，由于其临床症状易与　类风湿性关节炎、病毒性肝炎、结核、流行性感冒及　也较为快速，已逐渐成为布病诊断最为常用的手段。　诊断靶点则是诊断方法的核心，其决定了诊断的特　异性及敏感性，迄今布病的诊断靶点分为三类，即脂　多糖（ＬＰＳ）、外膜蛋白（ＯＭＰｓ）及其它菌体蛋白。现　将各诊断靶点做一简述。　１　脂多糖（ＬＰＳ）　各种骨关节病相混淆，仅依靠临床症状的误诊率仍　然较高［１。］，只有通过实验室检测才能确诊。　传统的布病实验室检测主要依赖于细菌分离培　布鲁氏菌ＬＰＳ有３个区域：类脂Ａ、核心低聚　养直接查到病原体，该方法耗时耗力，且实验室操作　存在潜在的危险性，并不实用；随着技术的发展，用　于人畜布病的血清学诊断方法已有试管凝集　糖和Ｏ抗原或Ｏ链，它的Ｏ链部分含有布鲁氏菌　表面绝大多数的抗原位点，是布鲁氏菌表面最为主　要抗原，根据ＬＰＳ是否含有Ｏ链将布鲁氏菌分为粗　造型（ｒｏｕｇｈ，Ｒ）和光滑型（ｓｍｏｏｔｈ，Ｓ）。研究表明Ｏ　链表面有７个不同的抗原位点，它们分别是Ａ、Ｍ、Ｃ　（Ｍ—Ａ）、Ｃ（Ｍ）Ａ）、ｃ／Ｙ（Ｍ＞Ａ）、ｃ／Ｙ（Ｍ—Ａ）、ｃ／　（ｓＡＴ）、虎红平板凝集（ＲＢＰＴ）、补体结合试验　通讯作者：宋志忠，Ｅｍａｉｌ：ｓｏｎｇｌ２０８＠１２６．ｃｏｒｎ　作者单位：１．大理学院公共卫生学院，大理　６７１０００；　２．云南省地方病防治所云南省鼠疫防控技术重点实验室　大理　６７１０００　Ｙ（Ａ＞Ｍ）等，这７种抗原决定基在所有的Ｓ型布鲁　氏菌中分布不均一，且没有各自特异性特征　，所　３期　夏淑婷等：布鲁氏菌病血清学诊断靶点的研究进展　３２５　以在采用血清学诊断布鲁氏菌病时，不能区分是自　然感染还是疫苗免疫。在这７个抗原位点中Ｃ／Ｙ　抗原是布鲁氏菌和小肠结肠炎耶尔森菌Ｏ：９共有　的抗原［１　，其中Ｃ／Ｙ（Ｍ—Ａ）抗原与小肠结肠炎耶　充分考虑临床症状及与可能交叉菌的排除检查。　２外膜蛋白（ＯＭＰｓ）　外膜蛋白（ＯＭＰｓ）是革兰氏阴性细菌的一类非　常独特但又非常重要的蛋白质，它们具有为外膜提　尔森菌Ｏ：９共有最多的一种抗原决定基，因此布　鲁氏菌病以ＬＰＳ为基础的诊断与小肠结肠炎耶尔　森氏菌Ｏ：９存在严重的交叉反应口。　；另外，布鲁氏　菌的ＬＰＳ与沙门氏菌、土拉伦菌、假单胞菌、霍乱弧　供通透性，维持外膜结构稳定等作用，同时有些　ＯＭＰｓ又是一类重要的免疫原性物质，能刺激机体　产生免疫应答反应，因此成为免疫学中一种重要的　诊断靶点。在布鲁氏菌中，已有十几种外膜蛋白被　菌以及大肠杆菌Ｏ：１５７等细菌也有一定的交叉反　应ｅｔａ－１６］。　研究作为诊断靶点，主要的有ＢＣＳＰ３１、ＢＰ２６、　Ｏｍｐｌ０、Ｏｍｐ２５及Ｏｍｐ３１等，它们与布鲁氏菌病诊　断存在交叉反应细菌中同源蛋白的氨基酸同源性大　都在５Ｏ　以下（ＢＣＳＰ３１与沙门氏菌的同源蛋白氨　基酸相似性达５７　～５８　），详见表１。下面就几种　主要的蛋白分述如下。　尽管如此，ＬＰＳ仍是迄今用于布病诊断最为常　用的靶点ｎ　，在布病的防控中发挥着不可替代的作　用。文献报道的所用的全菌蛋白、粗制外膜蛋白、盐　析蛋白、酚盐蛋白等＿】　］中，从其提取工艺上可看出，　最主要的成分仍是ＬＰＳ。使用ＬＰＳ为靶点诊断时，应　表１布鲁氏菌免疫原性外膜蛋白与存在交叉反应细菌中同源蛋白的氨基酸相似性　Ｔａｂ．１　Ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ　ｏｕｔｅｒ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｏｆ　ｉｔｓ　ｃｒ０ｓｓ—ｒｅａｃｔｉＯｎ　ｂａｃｔｅｒｉａ　Ｎｏｔｅ：ａ－－Ｙｅｒｓｉｎｉａ　ｐｅｓｔｉｓ，Ｙｅｒｓｉｎｉａ　ｓ　０　６　ｒｃ　￡０　ｓ，Ｙｅｒｓｉｎｉａ　ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ；ｂ－－Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｅｎｔｅｒｉｃａ，Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｔｙｐｈｉ　ｍｕｒｉｕｍ；Ｃ－－Ｖｉｂｒｉｏ　ｃｈｏｌｅｒａｅ，Ｖｉｂｒｉｏ　ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ，Ｖｉｂｒｉｏ　ｖｕｌｎｉｆｉｃｕｓ；ｄ－－Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ　ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ．　２．１　ＢＣＳＰ。　该蛋白分子量大小约３１　ｋＤ，为布鲁　氏菌细胞外膜蛋白，它抗原性强，具有保守性及多态　性，且种问同源性较高，经证实牛、羊、猪布鲁氏菌　ＢＣＳＰ。　基因同源性可达１００　［２。。。不同研究团队　的免疫蛋白质组学结果显示，该蛋白既有良好的免　成有关，其具体的作用机制有待进一步的研究＿２　。　有关其作为诊断靶点进行研究的报道较少，且主要　是国内的一些报道，在布鲁氏菌相关免疫蛋白质组　的报道中　引，也找不到Ｏｍｐｌ０有关的信息。　２．３　Ｏｍｐ２５该蛋白分子量大小为２５　ｋＤａ，在维持　疫反应性，又有较高的特异性＿２　。在布鲁氏菌的　基因诊断中，ＢＣＳＰ。　的编码基因也被作为ＰＣＲ诊　布鲁氏菌菌外膜结构稳定性中发挥着重要作用。其　编码基因在布鲁氏菌种、生物型及各菌株中是一个　断的主要靶点＿２　。但有研究者利用蛋白芯片进行　布鲁氏菌蛋白免疫学检测时，ＢＣＳＰ。　的抗体只存在　高度保守（除绵羊附睾种布鲁氏菌外同源性都在　９８　以上）。Ｏｍｐ２５的氨基酸序列在与布病有交叉　的细菌中又是最为特异。Ｂｏｉｇｅｇｒａｉｎ等＿２。］在分析　布鲁氏菌受到酸刺激分泌的蛋白质时发现，Ｏｍｐ２５　也被分泌到了细胞外；这提示这种蛋白与布鲁氏菌　于感染的山羊血清中，而被测定的６２份确认感染布　病的人血清中并未发现其抗体　，这也提示该外膜　蛋白作为诊断靶点在人群的检测中并不适用。　２．２　ＯｍｐｌＯ该蛋白分子量大小为ｉ０　ｋＤａ，属于菌　的膜分泌系统相关，其可分泌的特征一方面说明其　可能在菌相关蛋白中占有较高的丰度，相关蛋白质　体外膜脂蛋白，是布鲁氏菌重要的免疫原性蛋白，存　在于所有已知的布鲁氏菌的种和生物型之中［２５－２６］。　０ｍｐｌＯ与布鲁氏菌的毒力相关，有研究表明编码基　因的３　端具有１３８　ｂｐ的核酸序列与ＨｅｍＨ亚铁螯　合酶相同，因此推测其与细菌对铁的利用和生物合　组分析显示其在２Ｄ图谱上出现多个蛋白点［２１］；另　一方面，当布鲁氏菌感染宿主时，其可游离的特性使　其更易激发机体发生抗体。　２．４　ＢＰ２６又称Ｏｍｐ２８，分子量大小为２６　ｋＤａ，为　３２６　中国人兽共患病学报　可以诱导针对布鲁氏菌感染的细胞免疫作用，同时　布鲁氏菌的Ｏｍｐ３１有３个亲水性氨基酸残基片段，　它还能引起保护性体液免疫反应ｌ＿３　。已有以　布鲁氏菌细胞周质蛋白，ＢＰ２６存在于所有的布鲁氏　菌菌株中，在布鲁氏菌感染牛、绵羊、山羊和人中均　为优势免疫原，许多报道显示其可以用来作为血清　学检测的靶蛋白，并有较高的准确率＿２　。　；且有研究　者采用蛋白芯片的方法发现，该蛋白在所的布鲁氏　菌蛋白质组中唯一可与感染的人及羊血清特异反应　的靶点　。近来，ＢＰ２６上两个线性表位已经确认　（”ＤＲＤＬＱＴＧＧＩ　及　ＱＰＩＹＶＹＰＤ“　）ｌ３　，为进一　０ＭＰ３１为基础建立的免疫学检测方法检测布病的　相关报道ｌ＿３　，但在最近的蛋白芯片对感染人及山羊　检测的报道中，均未发现针对该蛋白抗体　，因此　对该蛋白作为检测靶点需进一步研究。　３　其它蛋白　步对该蛋白的免疫学分析提供了基础。综合上述信　息，该蛋白在布病检测上有较好的应用前景。　２．５　Ｏｍｐ３１该蛋白分子量大小为２５　ｋＤａ，该蛋白　暴露于细菌表面，常以寡聚体形式存在，当温度低于　６Ｏ℃时，具有ＳＤＳ变性的能力。它在布鲁氏菌不　同种属间非常保守，除流产布鲁氏菌（Ｂ．Ａｂｏｒｔｕｓ）　除ＯＭＰｓ外，布鲁氏菌中还有核蛋白Ｌ７／ＬＩ２，　伴侣蛋白ＧｒｏＥＬ及ＧｒｏＥＳ，热休克蛋白ＤｎａＫ，以　及超氧货物歧化酶ＳＯＤ等具有免疫原性，也是潜在　的诊断靶点而被关注，但这些蛋白其它交叉细菌同　源蛋白的氨基酸相似性大都达６Ｏ　９／６以上（表２），这　会一定程度上影响其作为布鲁氏菌诊断的特异性。　外，其它所有布鲁氏菌种株都有表达＿３　。　。Ｏｍｐ３１　表２布鲁氏菌免疫原性菌体蛋白与存在交叉反应细菌中同源蛋白的氨基酸相似性　Ｔａｂ．２　Ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ　ｍｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｏｆ　ｉｔｓ　ｃｒｏｓｓ－ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｂａｃｔｅｒｉａ　Ｎｏｔｅ：ａ－－Ｙｅｒｓｉｎｉａ　ｐｅｓｔｉｓ，Ｙｅｒｓｉｎｉａ户５ｅ“ｄ０￡“６　ｒｃ“￡０ｓ　ｓ，Ｙｅｒｓｉｎｉａ　ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ；ｂ－－Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｅｎｔｅｒｉｃａ，Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｔｙｐｈｉ　ｍｕｒｉｕｍ；ｃ－－Ｖｉｂｒｉｏ　ｃｈｏｌｅｒａｅ，Ｖｉｂｒｉｏ　ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ，Ｖｉｂｒｉｏ　ｖｕｌｎｉｆｉｃｕｓ；ｄ－－Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ　ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ．　３．１　Ｌ７／Ｌ１２该蛋白分子量大小为１０　ｋＤａ左右，为　清反应ｌ２　舱　。但该蛋白进化中具有较高的保守　性，因此单独将此作为诊断靶点，可能影响诊断的特　异性。　布鲁氏菌胞浆核蛋白，它是核糖体的重要组成部分，　在细菌蛋白质合成过程中与延长因子相互作用，在　布鲁氏菌中它的基因同源性高达９７．１　以上，免疫　原性分析Ｉ　７／Ｉ　１２只有第１５至第３５个氨基酸属于　综上所述，由于布鲁氏菌是革兰氏阴性菌，存在　Ｏ特异性抗原，因此ＬＰＳ仍然是布鲁氏菌病诊断的　最为重要的靶点，只是在做出诊断结论时要充分考　虑交叉反应的问题，可以结合临床症状与排除试验　加以确认。布鲁氏菌蛋白为靶点的诊断是布病诊断　的重要补充，是发展特异性诊断的努力方向。在蛋　疏水性氨基酸，剩余亲水性氨基酸残基占整个蛋白　序列的８０　以上ｌ＿３　，且作为抗原决定簇构成了蛋白　的主要部分，是Ｔ细胞优势抗原。以其为基础构建　的疫苗对感染具有最显著的抵抗作用口　。　。因此该　蛋白是一个潜在的诊断靶点。　３．２　ＧｒｏＥＬ该蛋白分子量大小为６０　ｋＤａ左右，是　白靶点中外膜蛋白更是重点，而其它蛋白则又是补　充。外膜蛋白中，从目前国内外研究进展看，ＢＰ２６　为首选靶点，ＢＣＳＰ。　次之，后续为ＯＭＰ２５，ＯＭＰ１０，　微生物中参与蛋白损伤修复的重要蛋白，同时在压　力条件下保持蛋白的正常折叠中发挥重要作用。有　ＯＭＰ３１，其中ＯＭＰ２５与ＯＭＰ３１各一布鲁氏菌的　一研究者通过构建的布鲁氏菌纳米小体抗体文库，发　现文库可特异性的识别伴侣蛋白ＧｒｏＥＬ，从而认为　个生物型中缺失。当然由于同一蛋白不同研究者　不同的实验条件，有些结果往往是相悖的，因此在研　该蛋白是布鲁氏菌的免疫主要蛋白＿３　。其它研究　者也发现，ＧｒｏＥＬ在对人及牛的感染中是一种重要　制诊断试剂时，全面的评价所有靶点，从中筛选实验　所得的较好靶点进行进一步研究是比较可靠的途　径。　的毒力因子，可与受布氏菌感染的人、牛及绵羊的血　３期　夏淑婷等：布鲁氏菌病血清学诊断靶点的研究进展　３２７　参考文献：　［１］Ｗａｎｇ　ＸＭ．Ｍｉｓｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　２　ｃａｓｅｓ　ｏｆ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ　ＥＪ］．　Ｃｌｉｎ　Ｍｉｓｄｉａｇｎ　Ｍｉｓｔｈｅｒ，２０１０，２３（５）：４６６．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　王雪梅．布鲁杆菌病二例误诊分析［Ｊ］．临床误诊误治，２０１０，２３　（５）：４６６．　［２］Ｓｏｎｇ　ＬＱ，Ｙｕｅ　ＬＹ，Ｓｏｎｇ　ＧＪ，ｅｔ　ａ１．Ｍｉｓｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｒｅｔｒ０ｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ａ　ｃａｓｅ　ｏｆ　ａ　ｃａｓｅ　ｏｆ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｍｉｓｄｉａｇｎ　Ｍｉｓ—　ｔｈｅｒ，２００７，２０（１０）：５７．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　宋丽琴，岳丽英，宋广杰，等．布氏杆菌病一例多次误诊回顾性　分析［Ｊ］．临床误诊误治，２００７，２０（１０）：５７．　Ｅ３］Ｙａｎｇ　Ｔ，Ｗｕ　Ｂ．Ｍｉｓｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　２２　ｃａｓｅ　ｏｆ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ　［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｃｌｉｎ　Ｄｏｃｔｏｒｓ，２００５，３３（６）：２９—３Ｏ．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　杨涛，吴兵．布氏杆菌２２例误诊分析［Ｊ］．中国临床医生，２００５，　３３（６）：２９－３０．　［４１Ｃｈａｎｇ　ＡＮ，Ｚｈａｎｇ　ＷＧ，Ｈｕｏ　ＸＬ，ｅｔ　ａ１．Ｍｉｓｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　２　ｃａｓｅ　ｏｆ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｍｉｓｄｉａｇｎ　Ｍｉｓｔｈｅｒ，２００８，２１（６）：　５１．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　常爱娜，张文贵，霍星蕾，等．布鲁氏菌病二例误诊报告［Ｊ］．临　床误诊误治，２００８，２１（６）：５１．　［５１Ｚｈａｎｇ　ＨＹ，Ｙｕ　ＭＸ，Ｌｉ　ＸＸ．Ｍｉｓｄｉａｇｎｏｓｅｄ　ｏｆ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ　ＥＪ］．　Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｍｅｄ．２００８，３０（３）：１４４—１４６．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　张红宇，于孟雪，李小霞．布鲁菌病误诊分析［Ｊ］．北京医学，　２００８，３０（３）：１４４—１４６．　［６］Ｓｏｎｇ　ＱＳ．Ｍｉｓｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　２９　ｃａｓｅｓ　ｏｆ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ［Ｊ１．　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｍｉｓｄｉａｇｎ，２００８，８（９）：２１１３－２１１４．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　宋青松．布鲁氏菌病误诊２９例分析［Ｊ］．中国误诊学杂志，２００８，　８（９）：２１１３—２１１４．　［７］Ｚｈｏｕ　ＷＸ，Ｌｕｏ　ＹＪ．Ｍｉｓｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　３２　ｃａｓｅｓ　ｏｆ　ｂｒｕｃｅｌｌｏ—　ｓｉｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｐｒａｃ　Ｉｎｔ　Ｍｅｄ，２００９，２９（６）：５５９．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　周文兴，罗英杰．布氏菌病３２例误诊原因分析ＥＪ］．中国实用内　科杂志，２００９，２９（６）：５５９．　［８］Ｇａｏ　ＭＨ，Ｚｈａｎｇ　ＺＹ，Ｌｉ　Ｙ．Ａｄｖａｎｃｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｌａｂ　ｄｉａｇ—　ｎｏｓｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｚｏｏｎｏｓｅｓ，２０１０，２６（１）：　８１—８３．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　高明华，张志琰，李跃．布鲁氏菌病实验室诊断研究进展［Ｊ］．　中国人兽共患病学报，２Ｏ１０，２６（１）：８１－８３．　［９］Ｗａｎｇ　Ｊ，Ｘｕ　ＷＧ．Ａｄｖａｎｃｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｓｅｒｏｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｍｅｔｈ—　ｏｄｓ　ｆｏｒ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｐａｔｈｏｇｎ　Ｂｉｏｌ，２００８，３（２）：１４９—　１　５２．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　王佳，徐卫国．布鲁氏菌病血清学诊断研究进展ＥＪ］．中国病原生　物学杂志，２００８，３（２）：１４９—１５２．　［１０］Ｍｅｉ　ＪＪ，Ｓｈｉ　ＨＹ．Ｐｒｅｓｓ　ｏｎ　ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｍａｃｒｏｃｙｃｌｉｃ　ｌａｃｔｏｎｅ　ｅｎｄｅｃｔｏｃｉｄｅｓ［Ｊ］．Ｐｒｏｇｒ　Ｖｅｔ　Ｍｅｄ，２００５，２６（１０）：１３－１８．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　梅建军，石慧英．布鲁氏菌表面抗原研究进展［Ｊ］．动物医学进　展，２００５，２６（１０）：１３—１８．　［１１］Ｗｅｙｎａｎｔｓ　Ｖ，Ｇｉｌｓｏｎ　ＤＡ，Ｃｌｏｅｃｋａｅｒｔ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｍｏｏｔｈ　ｎｐｏｐ０ｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ａｎｄ　０　ｐ０ｐｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｏｆ　ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｂｙ　ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ａｓｓａｙ　ｗｉｔｈ　ｍｏｎｏ　ｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄ—　ｉｅｓＥＪ］．Ｉｎｆｅｃｔ　Ｉｍｍｕｎ，１９９７，６５：１９３９—１９４３．　［１２］Ｍｕｆｉｏｚ　ＰＭ，Ｍａｔｉｎ　ＣＭ，Ｍｏｎｒｅａｌ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｅｆｆｉｃａｃｙ　ｏｆ　ｓｅｖｅｒａｌ　ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ｔｅｓｔｓ　ａｎｄ　ａｎｔｉｇｅｎｓ　ｆｏｒ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｂｏｖｉｎｅ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　ｆａｌｓｅ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｄｕｅ　ｔｏ　Ｙｅｒｓｉｎｉａ　ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ　０：９［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｄｉａｇ　Ｉ　ａｄ　Ｉｍｍｎｏｌ，２００５，　ｌ２（１）：１４１—１５１．Ｄ０Ｉ：１０．１１２８／ＣＤＬＩ．１２．１．１４１—１５１．２００５　［１３］Ｑｉｎｇ　Ｙ，Ｗａｎｇ　ＷＤ，Ｍｕ　ＨＴＥ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｒｕ　ｃｅｌｌａ　ａｎｄ　ｓｏｍｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｒｏｓｓ　ｒｅａｃ—　ｔｉｏｎ　ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｚｏｏｎｏｓｅｓ，１９９４，１０（４）：４７—４８．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　卿燕，王伟导，木合塔尔，等．布鲁氏菌与某些菌属细菌之间血　清学交叉反应观察［Ｊ］．中国人兽共患病学报，１９９４．１０（４）：　４７—４８．　［１４］Ｃｏｒｂｅｌ　ＭＪ，Ｓｔｕａｒｔ　ＦＡ，Ｂｒｅｗｅｒ　ＲＡ．Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｓｅｒｏｌｏｇｉ—　ｃａｌ　ｃｒｏｓｓ——ｒｅａｃｔｉｏｎｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｓｍｏｏｔｈ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ａｎｄ　ｏｒｇａｎ——　ｉｓｍｓ　ｏｆ　ｏｔｈｅｒ　ｇｅｎｅｒａ￣Ｊ］．Ｄｅｖ　Ｂｉｏｌ　Ｓｔａｎｄ，１９８４，５６：３４１—３４８．　［１５］Ｓｈａｎｇ　ＤＱ，Ｙｕ　ＥＳ，Ｚｈａｏ　ＨＹ．Ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｎｏｎｓｐｅ　ｃｉｆｉｃ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：Ｍａｒｌ—　ｔｉｍｅ　Ｐｒｅｓｓ，１９９５：８９　９１，９７．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　尚德秋，于恩庶，赵恒云．布鲁氏菌病实验诊断的非特异性反　应及其鉴定［Ｍ］．北京：海洋出版社，１９９５：８９—９１，９７．　［１６］Ｗａｎｇ　Ｌ．Ｓｈａａｎｘｉ　ｐｒｏｖｉｎｃｅ　ｆｏｕｎｄ　ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｐａｒａｔｙｐｈｉ　ａ　ａｎｄ　ｓｅ—　ｖｅｒｅ　ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｒｏｓｓ　ｒｅａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｅｎｄｅｍ　Ｄｉｓ　Ｂｕｌｌ，　２００４，１９（４）：５２－５３．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　王丽．陕西省发现甲型副伤寒沙门氏菌与布鲁氏菌存在严重血　清学交叉反应［Ｊ］．地立病通，２００４，１９（４）：５２—５３．　ｒ１　７］Ｌａｕｒｅｎｔ　ＴＣ，Ｍｅｒｔｅｎｓ　Ｐ，Ｄｉｅｒｉｃｋ　ＪＦ，ｅｔ　ａ１．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ，ｍｏｌｅｃｕ—　ｌａｒ　ａｎｄ　ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｉｖｅ　ａｎｔｉ—Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ＬＰＳ　ｍＡｂ［Ｊ］．Ｍｏｌ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００４，４０：１２３７～１２４７．ＤＯＩ：１０．１０１６／　ｊ．ｍｏｌｉｍｍ．２００３．１　１．０３７　［１８］Ｌｉ　ＬＭ，Ｗａｎｇ　Ｙ，Ｗａｎｇ　ＧＺ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃｏｌｌｏｉ—　ｄａｌ　ｇｏｌｄ　ｉｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａ　ｔｏ　ｇｒａｐｈｙ　ｒａｐｉｄ　ｓｃｒｅｅｎ　ｔｅｓｔ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｃｔｒｌ　Ｅｎｄｅｎ　Ｄｉｓ，２００６，２１（３）：　１４８—１　５０．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　李恪梅，王燕，王国治．布氏菌胶体金免疫层析快速检测板使用　效果评价［Ｊ］．中国地方病防治杂志，２００６，２１（３）：１４８—１５０．　［１　９１　Ｚｈａｎｇ　ＸＹ，Ｗｕ　ＹＧ，Ｗａｎｇ　ＺＬ．Ｃｅｌｌ　ｗａｌｌ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｆｏｒ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ　ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　ｔｅｓｔ　ｒｅｓｅａｒｃｈ［Ｊ￣．Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ａｎｉｍ　Ｑｕａｒａｎｔｉｎｅ，２００４，２１　（２）：２４—２６．（ｉｎ　Ｃ：ｈｉｎｅｓｅ）　张喜悦，吴延功，王志亮．细胞壁抗原用于布氏杆菌病诊断试验　的研究［Ｊ］．中国动物检疫，２００４，２１（２）：２４—２６．　ｒ２Ｏ］Ｌｉ　Ｐ，Ｌｕｏ　ＤＹ，Ｇａｏ　ＹＨ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｐｌａｓｍｉｄ　ＢＣＳＰ３１／ＰＶＡＸＩ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｎｄ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　０ｆ　ｉｔｓ　ｉｍｍｕｎｏ—ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　ｊ　Ｚｏｏｎｏｓｅｓ，２００６，２２　（６）：４９３－４９７．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　李鹏，罗德炎，高永辉，等．布氏杆菌ＢＣＳＰ３１／ｐＶＡＸ１重组表　达质粒的构建及其免疫保护效果的研究［Ｊ１．中国人兽共患病学　报，２００６，２２（６）：４９３—４９７．　［２１ｌＣｏｎｎｏｌｌｙ　ＪＰ，Ｃｏｍｅｒｃｉ　Ｄ，Ａｌｅｆａｎｔｉｓ　ＴＧ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃ　ａｎａｌｙ—　ｓｉｓ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｂｏｒｔｕｓ　ｃｅｌｌ　ｅｎｖｅｌｏｐｅ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｍｍｕ～　ｎｏｇｅｎｉｃ　ｃａｎｄｉｄａｔｅ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｆｏｒ　ｖａｃｃｉｎｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｐｒｏ—　ｔｅｏｍｉｃｓ，２００６，６（１３）：３７６７－３６８Ｏ．ＤＯＩ：１０．１００２／ｐｍｉｃ．　２００５００７３Ｏ　［２２］Ａ１Ｄａｈｏｕｋ　Ｓ，Ｎ６ｃｋｌｅｒ　Ｋ，Ｓｃｈｏｌｚ　ＨＣ，ｅｔ　ａ１．Ｉｍｍｕｎｏｐｒｏｔｅｏｍｉｃ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉ０ｎ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｂｏｒｔｕｓ　１　１　１　９－３　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｅｒｏｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ　Ｍｅｔｈ—　ｏｄｓ，２００６，３０９（１—２）：３４－４７．　［２３］Ｐｒｏｂｅｒｔ　ＷＳ，Ｓｅｈｒａｄｅｒ　ＫＮ，Ｋｈｕｏｎｇ　ＮＹ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ　ｍｕｌ—　ｔｉｐｌｅｘ　ＰＣＲ　ａｓｓａｙ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｓｐｐ．，Ｂ．ａｂｏｒｔｕｓ，　ａｎｄ　Ｂ．ｍｅｌｉｔｅｎｓｉｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００４，４２（３）：１２９０—　１２９３．ＤＯＩ：１０．１１２８／ｊｃｍ．４２．３．１２９０－１２９３．２００４　［２４］Ｌｉａｎｇ　Ｌ，Ｌｅｎｇ　Ｄ，Ｂｕｒｋ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｌａｒｇｅ　ｓｃａｌｅ　ｉｍｍｕｎｅ　ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ　ｏｆ　ｉｎｆｅｃｔｅｄ　ｈｕｍａｎｓ　ａｎｄ　ｇｏａｔｓ　ｒｅｖｅａｌｓ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｍｅｌｉｔｅｎｓｉｓ　ａｎｔｉｇｅｎｓ［Ｊ］．ＰＬｏＳ　Ｎｅｇｌ　Ｔｒｏｐ　Ｄｉｓ，２０１０，４　（５）：６７３．ＤＯＩ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａ１．ｐｎｔｄ．００００６７３　３２８　中国人兽共患病学报　２０１４，３０（３）　［２５］Ｔｉｂｏｒ　Ａ，Ｄｅｃｅｌｌｅ　Ｂ，Ｌｅｔｅｓｓｏｎ　ＪＪ．Ｏｕｔｅｒ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ＯｍｐｌＯ，Ｏｍｐｌ６，ａｎｄ　Ｏｍｐｌ９　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｓｐｐ．ａｒｅ　ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｔｏ　Ｏｍｐ３　１　ｆｒｏｍ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｍｅｌｉｔｅｎｓｉｓ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ａｎｄ　ａｎｉｍａｌ　ｉｎｆｅｃ—　ｔｉｏｎｓ　ｂｙ　ｓｍｏｏｔｈ　ａｎｄ　ｒｏｕｇｈ　ｂｒｕｃｅｌｌａｅ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｄｉａｇｎ　Ｌａｂ　Ｉｍｍｕ—　ｎｏｌ，２００４，１ｌ（１）：１１１－１１４．ＤＯｌ：１０．１１２８／ｃｄｌｉ．１１．１．１１１—　１１４．２００４　［Ｊ］．Ｉｎｆｅｃｔ　Ｉｍｍｕｎ，１９９９，６７（９）：４９６０　４９６２．　Ｅ２６］Ｃｌｏｅｃｋａｅｒｔ　Ａ，Ｔｉｂｏｒ　Ａ，Ｚｙｇｍｕｎｔ　ＭＳ．Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｏｕｔｅｒ　ｍｅｍ　ｂｒａｎｅ　ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｓｈａｒｅ　ａｎｔｉｇｅｎｉｃ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｏｆ　［３５］Ｚｈａｎｇ　ＧＬ，Ｍｉａｏ　ＬＧ，Ｌｉｕ　ＹＨ，ｅｔ　ａ１．Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｂｏｕｔ　Ｌ７／Ｌ１２，　ＯＭＰ３　１　ｇｅｎｅ　ｃｌｏｎｉｎｇ，ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉ—　ｔｈｅ　ｆａｍｉｌｙ　Ｒｈｉｚｏｂｉａｃｅａｅ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｄｉａｇｎ　Ｌａｂ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９９，６　（４）：６２７－６２９．　ｔｙＥＪ］．Ｓｐｅｃｉａｌ　Ｗｉｌｄ　Ｅｃｏｎｏｍ　Ａｎｉｍ　Ｐｌａｎｔ　Ｒｅｓ，２００９，４：５－８．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　［２７］Ｔｉｂｏｒ　Ａ，Ｗａｎｓａｒｄ　Ｖ，Ｂｉｃｌａｒｔｚ　Ｖ，ｅｔ　ａ１．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｏｍｐｌ０　ｏｒ　ｏｍｐｌ　９　ｄｅｌｅｔｉｏｎ　ｏｎ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｂｏｒｔｕｓ　ｏｕｔｅｒ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　张广雷，苗利光，刘艳环，等．布鲁氏菌Ｌ７／Ｌ１２、ＯＭＰ３１基因　的克隆、测序及免疫性分析［Ｊ］．特产研究，２００９，４：５－８．　［３６］Ｃｈｅｎ　ｗＹ，Ｗａｎｇ　ＳＪ，Ｗａｎｇ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　ＢＰ２６　ａｎｄ　ＯＭＰ３　１　Ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｉｎ　ａｎｄ　ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ　ｉｎ　ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｉｎｆｅｃｔ　Ｉｍｍｕｎ，２００２，７０（１０）：５５４０—　５５４６．ＤＯＩ：１０．１１２８／ｉａｉ．７０．１０．５５４０—５５４６．２００２　［２８］Ｂｏｉｇｅｇｒａｉｎ　ＲＡ，Ｓａｌｈｉ　Ｉ，Ａｌｖａｒｅｚ　Ｍａｒｔｉｎｅｚ　ＭＴ。ｅｔ　ａ１．Ｒｅｌｅａｓｅ　ｏｆ　ｐｅｒｉｐｌａｓｍｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｓｕｉｓ　ｕｐｏｎ　ａｃｉｄｉｃ　ｓｈｏｃｋ　ｉｎ—　ｉｎｄｉｒｅｃｔ　ＥＬＩＳＡ　ｔｅｓｔＥＪ］．Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｚｏｏｎｏｓｅｓ，２００６，２２（６）：５１８—　５２１．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　ｖｏｌｖｅｓ　ｔｈｅ　ｏｕｔｅｒ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｏｍｐ２５［Ｊ］．Ｉｎｆｅｃｔ　Ｉｍｍｕｎ，　２００４，７２（１０）：５６９３－５７０３．ＤＯＩ：１０．１１２８／ｉａｉ．７２．１０．５６９３—　５７Ｏ３．２００４　陈伟业，王淑杰，王永，等．重组布氏杆菌ＢＰ２６蛋白和ＯＭＰ３１　蛋白作为间接ＥＩ　ＩＳＡ诊断抗原研究［Ｊ］．中国人兽共患病学报，　２００６，２２（６）：５１８－５２１．　［２９］Ｒｏｓｓｅｔｔｉ　ＯＬ，Ａｒｅｓｅ　ＡＩ，Ｂｏｓｃｈｉｒｏｌｉ　ＭＬ。ｅｔ　ａ１．Ｃｌｏｎｉｎｇ　ｏｆ　Ｂｒｕ—　ｃｅｌｌａ　ａｂｏｒｔｕｓ　ｇｅｎｅ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　２６—‘ｋｉｌｏｄａｌ—＿　Ｅ３７］Ｋｕｒａｒ　Ｅ，Ｓｐｌｉｔｔｅｒ　ＧＡ．Ｎｕｃｌｅｉｃ　ａｃｉｄ　ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｂｏｒｔｕｓ　ｒｉｂｏｓｏｍａｌ　Ｌ７／Ｌ１２　ｇｅｎｅ　ｅｌｉｃｉｔｓ　ｉｍｍｕｎｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ［Ｊ］．　Ｖａｃｃｉｎｅ，１９９７，１５（１７　１８）：１８５１－１８５７．ＤｏＩ：１０．１０１６ｓｏ２６４—　４１０ｘ（９７）００１４０—０　ｔｏｎ　ｐｅｒｉｐｌａｓｍｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｕｓｅ　ｆｏｒ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓＥＪ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，１９９６，３４（１）：１６５－１６９．　ｒ３０］Ｃｌｏｅｃｋａｅｒｔ　Ａ，Ｂａｕｃｈｅｒｏｎ　Ｓ，Ｖｉｚｃａｉｎｏ　Ｎ，ｅｔ　ａ１．Ｕｓｅ　ｏｆ　ｒｅｃｏｍｂｉ　ｎａｎｔ　ＢＰ２６　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｎ　ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｍｅｌｉｔｅｎｓｉｓ　［３８］Ｚｅｎｇ　Ｚ，Ｗａｎｇ　Ｙ，Ｚｈａｏ　ＧＹ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＤＮＡ　ｖａｃ—　ｃｉｎｅ　ｃａｒｒｙｉｎｇ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｂｏｒｔｕｓ　ｒｉｂｏｓｏｍａｌ　Ｌ７／Ｌ１２　ｇｅｎｅ　ａｎｄ　ｅｖａｌ—　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｓｈｅｅｐ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｄｉａｇｎ　Ｌａｂ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００１，８：７７２—　７７５．　ｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｔｓ　ｉｍｍｕｎｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｉｎ　ｖａｃｃｉｎａｔｅｄ　ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｉｍ—　ｍｕｎｏｌ，２００４，２０（３）：２０８—２１２．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）　［３　１］Ｓｅｅｏ—Ｍｅｄｉａｖｉｌｌａ　Ｐ，Ｖｅｒｇｅｒ　Ｊ　Ｍ，Ｇｒａｙｏｎ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｅｐｉｔｏｐｅ　ｍａｐ—　ｐｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｍｅｌｉｔｅｎｓｉｓ　ＢＰ２６　ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎ：ｕｓｅ—　曾政，王英，赵光宇，等．布氏杆菌ｐＣＤＮＡ３．１－Ｌ７／Ｌ１２核酸疫　ｆｕｌｎｅｓｓ　ｆｏｒ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｓｈｅｅｐ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｄｉａｇｎ　Ｌａｂ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００３，１０（４）：６４７－６５１．ＤＯｌ：１０．１１２８／ｃｄｌｉ．１０．４．　６４７－６５１．２００３　苗的构建及其免疫学评价［Ｊ］．免疫学杂志，２００４，２Ｏ（３）：２０８　２１２．　［３９］Ａｂｂａｄｙ　ＡＱ，Ａ１一Ｄａｏｕｄｅ　Ａ，ＡＩ—Ｍａｒｉｒｉ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈａｐｅｒｏｎｉｎ　ｇｒｏｅｌ　ａ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｉｍｍｕｎｏｄｏｍｉｎａｎｔ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｕｓｉｎｇ　［３２］Ｑｉｕ　Ｊ，Ｗａｎｇ　Ｗ，Ｗｕ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｅｒｉｐｌａｓｍｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ＢＰ２６　ｅｐｉｔｏｐｅｓ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｍｅｌｉｔｅｎｓｉｓ　ｒｅａｃｔｉｎｇ　ｗｉｔｈ　ｍｕ—　Ｎａｎｏｂｏｄｙ　ａｎｄ　ＭＡＬＤＩ—ＴＯＦ－ＭＳｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ［－Ｊ］．Ｖｅｔ　Ｉｍｍｕｎｏ—　ｐａｔｈｏｌ，２０１２，１４６（３－４）：２５４—２６３．ＤＯＩ：１０．１０１６／ｊ．ｖｅｔｉｍｍ．　２Ｏ１２．０１．０１５　ｒｉｎｅ　ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　ａｎｄ　ｓｈｅｅｐ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓＥＪ］．ＰＬｏＳ　Ｏｎｅ，２０１２，７　（３）：３４２—３４６．ＤＯＩ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａ１．ｐｏｎｅ．００３４２４６　［３３］Ｖｉｚｃａｉｎｏ　Ｎ，Ｐａｓｑｕｅｖｉｃｈ　Ｋ，Ｂｒｕｎｏ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ｃｌｏｎｉｎｇ，ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ，ａｎｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｏｍｐ３　１　ｇｅｎｅ　ｃｏｄｉｎｇ　ｆｏｒ　［４０］Ａｍｉｒｍｏｚａｆａｒｉ　Ｎ，Ｇｈａｚｉ　Ｆ，Ｍｏｓｔａｆａｚａｄｅｈ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｈｅａｔ　ｓｈｏｃｋ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｉｎ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｂｏｒｔｕｓ　ａｎｄ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｎ　ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃ　ｍａｊｏｒ　ｏｕｔｅｒ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｐｒｏｔｅｉｎＥＪ］．Ｉｎｆｅｃｔ　Ｉｍ　ｍＵＤ，１９９６，６４（９）：６５３７－６５４０．　ｍｅｌｉｔｅｎｓｉｓ［Ｊ］．Ｐａｋ　Ｊ　Ｂｉｏｌ　Ｓｃｉ，２００８，１１：１８８　１９４．　［３４］Ｃａｓｓａｔａｒｏ　Ｊ。Ｐａｓｑｕｅｖｉｃｈ　Ｋ，Ｂｒｕｎｏ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｔｉｂｏｄｙ　ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ　收稿日期：２０１３－０７　ｌ５；修回日期：２０１３－１２—１０　（上接封３）　点可变数目串联重复序列分析。我们系统地收集了　２２２株来自Ｃｈｈａｔａｋ和Ｍａｔｈｂａｒｉａ外环境及临床的　显微镜检敏感性为８６　。激光热对比定量试验测　量免疫层析条带中的ＣＲＡＧ浓度有９２　的准确性　（Ｒ一０．９１，Ｐ＜０．００１）。在资源有限的条件下，　ＣＲＡＧ　ＬＦＡ对脑膜炎诊断是一种很大的进步。　Ｐ５４孟加拉国２０１０—２０１１年霍乱暴发期间霍乱　弧茵的遗传变异／／Ｓｈａｈ　Ｍ．Ｒａｓｈｅｄ，Ａｎｄｒｅｗ　Ｓ．Ａｚ－　Ｏ１群霍乱弧菌菌株。Ｃｈｈａｔａｋ的７９株菌株中有７５　株来自同一克隆复合群，该复合群在单一基因位点　随时间发生连续广泛的突变。共有５９株分离自６　位患者，大多数来自同一患者的分离株出现连续的　单位点突变。Ｍａｔｈｂａｒｉａ的８４株菌株中有６０株形　成２个独立的克隆复合群。与来自环境的菌株相　ｍａｎ。Ｍｕｎｉｒｕｌ　Ａｌａｍ等　霍乱仍是一个主要的公共卫生问题。为了比较　外环境菌株和病人菌株在暴发中所起的不同作用，　我们在孟加拉国２个不同的地理区域收集了　比，来自患者的菌株形成的遗传谱系数量较少，这与　疾病暴发期间某些菌株在人间加速传播的现象相吻　合。　（福建省疾病预防控制中心　周淑妲译，邓艳琴校）　２０１０—２Ｏ１１年霍乱暴发期间的标本，对其进行多位