实验一红细胞计数学院:****学院专业年级:20***级******学号:31800*00**姓名:**实验日期:2020年9月15日2020一、实验原理
用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池中,于显微镜下计数一定体积内的红细胞数,经过换算求得每升血液中的红细胞数量。二、实验内容与步骤1、实验器材
显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板2、实验试剂
RBC稀释液:生理盐水3、标本
本样本为成年男性血液样本外周血或抗凝血(EDTA抗凝)4、实验方法
(1)小试管加RBC稀释液2.0ml。(2)采血,取血10μl。
(3)擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2~3次,立即混匀。(4)混匀后充入计数室,静置3~5min,高倍镜下计数。(用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中共5个中方格内的红细胞数)(5)代入公式计算
RBC/L=5个中方格内RBC数×5×10×200×106
=5个中方格内RBC数/100×1012三、实验结果1、红细胞形态
红细胞呈双凹圆盘状,在高倍镜下见到为圆形,中央淡染,大小较一致。2、红细胞计数
(1)红细胞计数区域图片
图片1(左上计数区域):共计110个红细胞
图片2(左下计数区域)共计104个红细胞
图片3(右下计数区域)共计103个红细胞
图片4(右上计数区域)共计120个红细胞
图片5(中间计数区域)共计116个红细胞
左上计数区左下计数区右下计数区右上计数区中计数区域
域110
域104
域103
域120
116
553总数
(2)计算过程
RBC/L=(110+104+103+120+116)×5×10×200×106=5.53×1012/L男
性:(4.0~5.5)×1012/L
RBC:5.53×1012/L略高于正常值四、讨论1、注意事项
(1)采血时不要过分挤压。
(2)取血量须准确,动作要迅速,防止血液凝固。(3)血液加入稀释液后,应立即混匀。
(4)充池前要摇匀,一次性充池,不能产生气泡,溢出或不足都要擦干净后重新充池。
(5)压线细胞应数上不数下,数左不数右。
2、讨论
(1)实验数据存在偶然性,应进行重复实验进行验证。
(2)红细胞相对性增多见于呕吐、腹泻、大量出汗、甲亢危象、尿崩症、糖尿病酮症酸中毒等,绝对性中毒见于红细胞生成素增多或骨髓增殖性肿瘤。
本次实验计数略微高于正常值也有可能是吸管错误使用,稀释液加入过少、血液样本加入过多、稀释时没有充分混匀。(3)标本可见明显丝虫病感染。
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