剪鼠尾测DNA
Tail Buffer
Tris-Hcl pH8.0 10mM
Nacl 100mM
EDTA pH8.0 10mM
SDS 0.5％
称取SDS 2.5g，Nacl 2.922g，溶于少量水，置500mL容量瓶中，加0.05M EDTA(pH 8.0) 100mL，0.5M Tris-Hcl(pH 8.0)10mL，一起入容量瓶，最后定容到500mL.
蛋白酶K
储存液 10mg/mL
酚氯仿抽提DNA的步骤
1． 剪小鼠尾 0.5-1cm，放入1.5mL EP管中，加入Tail Buffer 500μL，加入蛋白酶K 15μL（10mg/mL），55℃水浴振荡过夜；
2． 通风柜中加入500μL酚氯仿，振荡混匀成悬浮状，4℃12000rpm离心12min；
3． 取上清（切不可吸到中间膜层或下层）约400μL，加入在-20℃预冷的无水乙醇800μL，上下颠倒混匀，4℃12000rpm离心5min；
4． 取沉淀，加入75％的乙醇1 mL振荡混匀，漂洗。4℃12000rpm离心5min；
5． 可重复第4步一次；
6． 取沉淀，干燥；
7． 加TE或无核酶水30-50μL；
8． 37℃水浴1-3h溶解，可以在55℃水浴帮助溶解15min；
9． 浓度测定。
因篇幅问题不能全部显示，请点此查看更多更全内容