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维普资讯 http://www.cqvip.com 中国公共卫生２００２年第１８卷第１Ｏ期ＣＨＩＮＡ　ＰＵＢＬＩＣ　ＨＥＡＬＴＨ　Ｖｏ１．１８　Ｎｏ．ＪＯ　Ｏｃｔ　２００２　１１７７　段凝胶回收可分别获得纯的单一的片段，能用于重组转化及基　１９９０，８７：１８８９—１８９３．　因序列分析鉴定等后续的研究分析。由此可见，ｃＤＮＡ—ＲＤＡ　［４］Ｈｕｂａｎｋ　Ｍ　ａｎｄ　Ｓｃｈａｔｚ　ＤＧ．Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｉｎ　ｍＲＮＡ　ｅｘ—　ｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｂｙ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｎａａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｃＤＮＡ［Ｊ］．Ｎｕｃｌｅ—　在筛选致癌物特异基因的应用中非常可靠和实用。　ｉｃ　Ａｃｉｄｓ　ＲｅＳ，１９９４。２２（２５）：５６４０—５６４８．　最近，已出现了利用固相技术改进ｃＤＮＡ—ＲＤＡ方法　以　［５］　Ｂｅｒｍｉｎｇｈａｍ　ＪＲ，Ｓｈｕｍａｓ　Ｓ，Ｗｈｉｓｅｎｈｕｎｔ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．Ｍｏｄｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　及将ｃＤＮＡ—ＲＤＡ与ＤＮＡ微阵列结合使用【９】的方法，这将进　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｐｐｌｉｄｅ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ—ｒｅｇｕｌａｔｅｄｇｅｎｅｓｆｒｏｍＳｅｈｗａｎｎ　ｃｅｌｈ［Ｊ］．Ｊ　ＮｅｕｒｏｓｃｉＲｅｓ，　一步提高ｃＤＮＡ—ＲＤＡ方法的适用性，使其在环境致癌因素诱　２００１，６３（６）：５１６—５２４．　导特异致癌基因的分离与鉴定研究工作中可被应用推广。　【６】Ｄａｖｅｎｐｏｒｔ　Ｊ，Ｎｅａｈ　ＧＡ＇Ｇｏｏｒｈａ　Ｒ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｅｎｅｓ　ｐｏｔｅｎｔｉｌａ—　作者简介：蒋义国（１９６６一），男，江西省瑞昌市人，副教授，博士，　ｌＹ　ｉｎｖｏｌｖｅｄ　ｉｎ　ｉｎ　ＬＭ０２一ｉｎｄｕｃｅｄ　Ｌｅｕｋｃｅｍｏｇｅｎｅｓｉｓ【Ｊ　Ｊ．Ｌｅｕｋｅｎｔｉａ，　主要从事环境毒理学研究。　２００ｏ．１４（１１）：１９８６—１９９６．　［７］　Ｒｕｔｈｅｒｆｏｒｄ　ＭＮ，Ｂａｙｌｙ　ＧＲ，Ｍａｔｔｈｅｗｓ　ＢＰ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　Ｌｅｕｋｃｅ—　参考文献　ｍｏｇｅｎｉｃ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　Ｅ２　ａ—Ｐｂｘ　１　ｉｎｄｕｃｅｓ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｕｔａｔｉｖｅ　Ｎ—ｍｙｌ　ａｎｄ　ｐ５３　ｔａｒｇｅｔ　ｇｅｎｅ　ＮＤＲＧ１　ｉｎ　Ｂａ／Ｆ３　ｃｅｎｓ［Ｊ］．　［１］　Ｃｈｕ　ＣＣ，Ｐａｕｌ　ＷＥ．Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　ｉｎｔｅｒｈｕｋｉｎ一４　ｔｒｅａｔｅｄ　Ｂ　Ｌｅｕｋｅｍｉａ，２００１，１５（３）：３６２—３７０．　ｃｅｌｌｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｄｅ　ｂｙ　ｃＤＮＡ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｃ　Ｊ］．　［８］　Ｏｄｅｂｅｒｇ　Ｊ，Ｗｏｏｄ　Ｔ，Ｂｌｕｃｈｅｒ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ｃＤＮＡ　ＲＤＡ　ｐｒｏｔｏｃｏｌ　ｕｓｉｎｇ　Ｍｏｌ　Ｉｍｍｕｎｏ１．１９９８，３５：４８７—５０２．　ｓｏｌｉｄ—ｐｈａｓｅ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｓｕｉｔｅｄ　ｆｏｒ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｉｎ　ｓｍａｌｌ　ｔｉｓｓｕｅ￥ａｉｎｐｌｅｓ　【２】蒋义国，陈家垫，陈学敏．苯并（ａ）芘代谢物反式二羟环氧苯并芘　【Ｊ］．Ｂｉｏｍｏｌ　Ｅｎｇ，２０００，１７（１）：１—９．　诱发人支气管上皮细胞恶性转化【Ｊ］．卫生研究，２００１，３０（３）：　［９］　Ｆｒｏｈｍｅ　Ｍ，Ｓｅｈａｒｒｎ　Ｂ．Ｄｅｌｉｓｕ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｕｓｅ　ｏｆ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌ　ｄｉｆ—　１２９—１３１．　ｆｅＦｅｎｃｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　ｃＤＮＡ　ａｒｒａｙｓ　ｏｆｒ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ　ｏｆ　ｔｕ—　［３］　Ｓｔｒａｕｓ　Ｄ　ａｎｄ　Ａｕｓｕｂｅｌ　ＦＭ．Ｇｅｎｏｍｉｃ　ｓｕｂｔｆａｃｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｃｌｏｎｉｎｇ　ＤＮＡ　ｒｉｇｏｒ　ｔｉｓｓｕｅ［Ｊ］．Ａｎｎ　Ｎ　Ｙ　Ａｃａｄ　Ｓｅｉ，２０００，９１０：８５—１０４．　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｇｎ　ｔｏ　ｄｅｌｅｔｉｏｎ　ｍｕｔａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵＳＡ。　（２００１一Ｏ９—１７收稿２００１—１０—２２修回李溪莹编辑刘铁校对）　文章编号：１００１—０５８０（２００２）１０—１１７７—０１　【检验技术】　ＡＡＣＤ分光光度法测定植物油中的镍　山东省肥城市卫生防疫站（２７１６００）　冯枫邱培梅邹丽丽　袁　宏　中图分类号：Ｒ１１５　文献标识码：Ｂ　油脂中镍的测定有原子吸收光谱法、丁二酮肟分光光度　１．０ｍｌ。（５）检量线及线性范围：试验结果表明，镍含量在０～　法，但这些方法或灵敏度低，或操作繁琐。用　Ｄ（２一氨基　４￣ｇ／ｍｌ范围内遵守比耳定律。标准曲线回归方程为：Ａ：　一１一环己烯一１一二硫代碳酸铵）光度法测定植物油中镍，操　０．０５８Ｃ＋０．００６　５相关系数ｒ＝０．９９９　３（　＝８）；摩尔吸光系　作简便，灵敏度高，稳定性较好。现报告如下。　数：Ｅ５３５为２．８Ｘ　１０　Ｌ・ｍｏｌ－１－ｃｒｎ～。（６）共存离子的干扰及　试剂及仪器镍标准溶液：称取基准镍粉０．１００　０ｇ，溶于　消除：在试验条件下，对于镍２．０　ｇ的测定，相对误差小于±　［ｃ（ＨＣ１）：０．５ｍｏｌ／Ｌ］盐酸溶液移入１　０００ｍｌ容量瓶中，并稀　５％，下列共存离子（以ｍｇ计）：Ｃｌ卜、Ｂｒ卜、Ｉ卜、ｓ０ｉ一、Ｎｏ；一、　释至刻度，即为Ｎｉ（１００ｖｇ／ｍ１）储备液，同时稀释成２．０　ｇ／ｒｎｌ。　草酸盐、柠檬、酸盐、Ｃ　Ｃ（）０卜、高碘酸盐、邻苯二甲酸盐　ＡＡＣＤ水溶液［ｃ（ＡＡＣＤ）：３．０　ｘ　１０Ｉ３ｍｏｌ／Ｌ］。硝酸钡溶液　（２．０）；Ａ１ｓ　、Ｈｇ２　、Ｃａ２　、Ｍｇ２　、Ｋ　、Ｎａ　、Ｓ、Ｃｕ２　、Ｍｎ２　（＜　（２０ｇ／Ｌ）。饱和硫氰酸铵溶液。丙酮。所用溶液均用分析纯　２．０）、ＣＯ１一、Ｐ　一（＜１．０）；ｃ　一、Ｐ（）ｉ一产生的干扰，加入　试剂和二次蒸馏水配制。７２１分光光度计（上海）。　２０ｇ／Ｌ硝酸钡溶液可消除。Ａｌ３　、Ｈ　、Ｃａ２　、Ｍｇ２　、Ｋ　、　试验方法标准曲线制备：吸取镍标准溶液（２￣ｇ］ｍ１）０，　Ｎａ　、Ｓｎ、Ｃｕ２　、Ｍｎ２　干扰，可加入饱和硫氰酸铵溶液消除。　０．１，０．３，０．５，０．７，１．０，１．５，２．０ｍｌ于１０ｍｌ比色管中，加入　（７）方法的精密度及回收率：应用本法测定植物油中镍，见附　１．０ｍｌ　２０ｇ／Ｌ硝酸钡溶液，混匀，再加１．０ｍｌ饱和硫氰酸铵溶　表．平均回收率为９４．７％～１００．４％．相对标准偏差为５．９％。　液，混匀，再加入１．０ｍｌ［ｃ（ＡＡＣＤ）：３．０　ｘ　１０～ｍｏｌ／Ｌ］２一氨　（８）与原子吸收光谱法的比较：采用原子吸收光谱法与本法同　基一１一环已烯一１一二硫代碳酸铵溶液，混匀，加丙酮稀释至　时测定２０份样品镍含量，两法测定结果经ｔ检验，ｔ：２．０３２．　刻度，混匀。以试剂空白作参比，１．０ｃｍ比色皿，在５３５ｎｍ处　Ｐ＞０．０５．两法所测结果差异无显著性。详见表１。　测定吸光度值。样品中镍的则定：称取油样４０．０ｇ于１００ｍｌ　．　表１样品分析结果　容量瓶中，加丙酮稀释至刻度，混匀。吸取２．０ｍｌ丙酮稀释液　于１０ｍｌ比色管中，以下步骤同标准曲线制备。　结果与讨论（１）吸收曲线：取２．０　ｇ镍标准液，按试验　方法测定络合物在不同波长下的吸光度，有色络合物最大中　有收波长位于５３５ｎｍ。（２）酸度的影响：按试验方法调节反应　体系的ｐＨ值，测定不同ｐＨ值下体系的吸光度值。试验表　明，ｐＨ５．０～８．０问体系的吸光度基本恒定。（３）络合物的稳　定性：在选定的试验条件下．络合物最大吸光度２ｈ内不变。　（４）ＡＡＣＤ溶液用量：按试验方法选加不同量的ＡＡＣＤ溶液［ｃ　＊加入镍标准１．５Ｏ　・ｍｌ　（　Ｄ）：３．０ｘ　１０．３ｍｏｌ／Ｌ］。试验表明，ＡＡＣＤ溶液加入量　＊＊加入镍标准２．ＯＯ　－ｍｌＩ１　作者简介：冯枫（１９５７一），女，主管检验师，主要从事检验工作。　为１．０ｍｌ时体系吸光度最大且恒定。本试验选加　Ｄ溶液　（２００２—０１—２１收稿２００２—０２—１１修回任旭红编辑刘铁校对）