大肠埃希菌
形态与染色特性: 1、周身鞭毛 2、能运动
3、无芽孢,不产生荚膜。
4、菌体两端钝圆、中等大小,杆状(有时呈卵圆形)、1-3umx0.6um 5、革兰氏阴性
培养特性: 1)需氧及兼性厌氧菌
2)对营养的要求不高,最适生长温度为37℃,最适pH为7.2—7.4。 3)在普通琼脂平板上培养24小时,可形成圆形、凸起、光滑、湿润、半透明、边缘整齐、中等大小的菌落.其菌落与沙门氏菌比较相似。 4)在肉汤培养基中生长18~24小时变为均匀浑浊,而后底部出现粘性沉淀物,并伴有臭味
生化反应:
1.对糖的代谢能力:
大部分菌株发酵乳糖产酸产气,并发酵葡萄糖、麦芽胞、甘露醇、木胶糖、阿拉伯胶等产酸产气。
2.IMViC试验为“+、+、-、-”。即为典型大肠杆菌。
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培养基 曙红亚甲蓝琼脂 菌落形态 紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色,菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心,圆形,稍凸起,边缘整齐,表面光滑,湿润,常有金属光泽 麦康凯琼脂 鲜桃红色或微红色,菌落中心呈深桃红色,圆形,扁平,边缘整齐,表面光滑,湿润
生化试验:
①靛基质试验 为阳性,玫瑰红色吲哚,培养基为蛋白胨水培养基。 (液面呈玫瑰红色为阳性,呈试剂本色为阴性。)
原理:大肠埃希菌能分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合,形成玫瑰吲哚,为红色化合物。
②甲基红试验 为阳性,呈鲜红色或橘红色,培养基为磷酸盐葡萄糖胨水培养基。(呈鲜红色或橘红色为阳性,呈黄色为阴性)
原理:某些细菌在糖代谢过程中,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步被分解为大量混合酸,使培养基pH下降至4.5以下,加入甲基红指示剂可呈红色。
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③乙酰甲基甲醇生成试验(V-P) 为阴性(无红色),要加入α-萘酚乙醇试液1ml,混匀,再加40%氢氧化钾试液0.4ml。
培养基为磷酸盐葡萄糖胨水培养基。(在4h(通常在30min时)内出现红色判为阳性,无红色判为阴性)
原理:葡萄糖→丙酮酸(脱羧)→乙酰甲基甲醇→2,3—丁烯二醇,在有碱存在时氧化成二乙酰,后者和胨中的胍基化合物起作用产生粉红色的化合物。
④枸橼酸盐利用实验 为阴性,培养基本来为绿色,不变色为阴性,培养基为枸橼酸盐培养基斜面。(培养基变蓝色,为阳性;不变,为阴性)
原理:细菌分解柠檬酸盐生成碳酸盐,进而氨盐分解,产生氨,培养基变碱,显深蓝色。
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